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GADD45β基因表达诱导对不同p53状态的肝癌细胞作用
引用本文:邱伟华,Bingsen Zhou,Dana Darwish,Peiguo G. Chu,Frank Luh,陈皓,邓侠兴,沈柏用,杨卫平,李宏为,YEN Yun. GADD45β基因表达诱导对不同p53状态的肝癌细胞作用[J]. 外科理论与实践, 2005, 10(2): 155-160,164
作者姓名:邱伟华  Bingsen Zhou  Dana Darwish  Peiguo G. Chu  Frank Luh  陈皓  邓侠兴  沈柏用  杨卫平  李宏为  YEN Yun
作者单位:1. 美国希望市国家医学中心,肿瘤治疗研究科,CA 91010,USA;上海第二医科大学附属瑞金医院外科,上海消化外科研究所,上海,200025
2. 美国希望市国家医学中心,肿瘤治疗研究科,CA 91010,USA
3. 美国希望市国家医学中心,病理科CA,91010,USA
4. 上海第二医科大学附属瑞金医院外科,上海消化外科研究所,上海,200025
基金项目:美国Ralph M Parsons Foundation,Sino-AmericanCancerFoundation,上海市教育委员会课题(04BC32)资助
摘    要:目的:体外合成GADD45β基因全序列表达质粒后,研究GADD45β基因表达诱导对呈不同p53状态的肝癌细胞的作用及可能机制。方法:采用RT-PCR法获得GADD45β基因全序列,插入pDrive穿梭克隆载体和pIRES2-EGFP荧光表达载体后大量扩增获得DNA,结合p53全基因表达质粒pp53-EGFP转染HepG2、Hep3B细胞后,以[^3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法(^3H—Tdr)和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力;以双抗体夹心ELISA法测定TGF-β1表达变化。结果:成功合成GADD45β基因全序列和表达质粒,通过流式细胞仪收集转染阳性的荧光表达细胞能显著提高转染效率;转染GADD45β后.具有野生型p53基因的HepG2细胞的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制,细胞凋亡明显增加,TGF-β1的表达亦明显受抑。与之相反,缺失p53基因的Hep3B需要同时共转染p53基因后,方出现抑制效应。结论:GADD45β基因能够有效抑制肝癌细胞的生长.其功能需要完整p53基因的辅助和(或)调控。GADD45表达和(或)功能异常,导致p53介导的DNA损伤修复途径异常或阻断,是肝脏细胞恶性转化及形成肿瘤的可能机制。

关 键 词:肝肿瘤 基因,GADD45β 基因,p53 细胞凋亡
文章编号:1671-2870(2005)02-0155-06
修稿时间:2004-11-03

The effect and mechanism of growth arrest DNA damage-inducible gene 45β induction in liver cancer cell lines with different p53 status
QIU Wei-hua,Bingsen Zhou,Dana Darwish,Peiguo G. Chu,Frank Luh,CHEN Hao,DENG Xia-xing,SHEN Bai-yong,YANG Wei-ping,LI Hong-wei,YEN Yun. The effect and mechanism of growth arrest DNA damage-inducible gene 45β induction in liver cancer cell lines with different p53 status[J]. Journal of Surgery Concepts & Practice, 2005, 10(2): 155-160,164
Authors:QIU Wei-hua  Bingsen Zhou  Dana Darwish  Peiguo G. Chu  Frank Luh  CHEN Hao  DENG Xia-xing  SHEN Bai-yong  YANG Wei-ping  LI Hong-wei  YEN Yun
Abstract:
Keywords:
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