| KLF2过表达及敲减胃癌稳转细胞株的建立 |
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| 引用本文： | 王春梅,陈金联.KLF2过表达及敲减胃癌稳转细胞株的建立[J].同济大学学报(医学版),2017,38(5):18-23. |
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| 作者姓名： | 王春梅 陈金联 |
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| 作者单位： | 同济大学附属东方医院消化内科，上海200120,同济大学附属东方医院消化内科，上海200120；上海交通大学附属第六人民医院南院消化内科，上海201499 |
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| 基金项目： | 上海市自然科学基金（16ZR1429100） |
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| 摘 要： | 目的 构建KLF2过表达BGC823和KLF2敲减MGC803胃癌稳转细胞株。方法克隆人源KLF2基因，连接到AgeI/AgeI酶切后GV358载体上，构建GV358-KLF2重组质粒，转染293T细胞，包装慢病毒；构建KLF2shRNA，连接到BamHI和EcoRI双酶切后的PHBLV-U6-ZSGreen-Puro载体上，经鉴定后转染293T细胞。采用RT-PCR及Western印迹法检测稳转细胞株中KLF2的表达。结果利用慢病毒介导，重组质粒GV358-KLF2和KLF2-shRNA转导入BGC823细胞、MGC803细胞并稳定表达。RT-PCR和Western印迹法结果均显示过表达稳转株KLF2表达量明显升高（P＜0.05）,敲减稳转株KLF2表达量明显下降（P＜0.05）。结论成功构建了KLF2过表达BGC823细胞株和KLF2敲减MGC803细胞株，为后续KLF2功能实验奠定了基础。
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| 关 键 词： | KLF2基因 稳转株 敲减稳转 BGC823细胞 MGC803细胞 |
| 收稿时间： | 2017/4/12 0:00:00 |
Establishment of gastric cancer cell lines with over-expressed KLF2 and knockdown KLF2 |
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| WANG Chun-mei and CHEN Jin-lian.Establishment of gastric cancer cell lines with over-expressed KLF2 and knockdown KLF2[J].Journal of Tongji University(Medical Science),2017,38(5):18-23. |
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| Authors: | WANG Chun-mei and CHEN Jin-lian |
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