| 二氢生物喋呤还原酶参与调控HEK293T细胞自噬作用的初步研究 |
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| 引用本文： | 古艳婷. 二氢生物喋呤还原酶参与调控HEK293T细胞自噬作用的初步研究[J]. 中国比较医学杂志, 2012, 22(11): 1-5 |
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| 作者姓名： | 古艳婷 |
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| 作者单位： | 古艳婷 (北京协和医学院,北京,100021) ； 赵婷婷 (卫生部中日友好医院临床医学研究所,北京,100029) ； 李平 (北京协和医学院,北京,100021) ； 张浩军 (北京协和医学院,北京,100021) ； 朱斌 (北京协和医学院,北京,100021) ； 韩文兵 (北京协和医学院,北京,100021) ； 董晞 (北京协和医学院,北京,100021) ； 费敏 (北京协和医学院,北京,100021) ； 孙斯凡 (北京协和医学院,北京,100021) ； |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目,国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | ![]()
目的探讨二氢生物喋呤还原酶(dihydropteridine reductase,QDPR)对HEK293T细胞自噬作用的影响。方法构建野生型QDPR和突变型QDPR重组质粒分别转染HEK293T细胞,并设空载体对照组。采用RT-PCR及Western blot方法检测空载体组,野生型QDPR组和突变型QDPR组自噬相关蛋白LC3和Beclin 1的表达量变化。结果 1)测序结果证实PCR扩增得到编码正常QDPR的cDNA序列正确以及突变的cDNA也在正确的位置突变;2)磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,野生型QDPR和突变型QDPR融合蛋白成功表达;3)RT-PCR结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3基因水平明显上调(P0.05),突变型QDPR组LC3基因水平与对照组相比无统计学差异;与对照组相比,野生型和突变型组Beclin1基因水平无统计学差异;4)Western blot结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3-II和Beclin1的蛋白表达量明显上调(P0.05),但LC3-I的蛋白表达量无统计学差异,突变型QDPR组与对照组相比LC3-I,II和Beclin1的蛋白表达量均没有统计学差异(P0.05)。结论二氢生物喋呤还原酶能增强HEK293T细胞自噬相关基因LC3和Beclin 1的表达,提示其可能具有激活自噬作用的功能;二氢生物喋呤还原酶93位氨基酸的突变影响了其对细胞自噬作用的调控,降低了自噬标志分子LC3-I和Beclin1的基因表达。
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| 关 键 词： | 二氢生物喋呤还原酶 自噬 糖尿病肾病 LC3 Beclin1 |
| 收稿时间： | 2012-07-27 |
| 修稿时间： | 2012-09-13 |
Effects of QDPR on regulating the autophagy of HEK293T cells |
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| guyanting. Effects of QDPR on regulating the autophagy of HEK293T cells[J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2012, 22(11): 1-5 |
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| Authors: | guyanting |
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| Affiliation: | 1(1.Peking Union Medical College,Beijing 100021,China; 2.Department of Pharmacology,Institute of Clinical Medical Sciences,China-Japan Friendship Hospital,Beijing 100029,China) |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | dihydropteridine reductase autophagy diabetic nephropathy LC3 Beclin1 |
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