| 人成纤维细胞生长因子-21单克隆抗体的制备及抗原表位的确定 |
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| 引用本文： | 郝智超,徐黎明,白银,王琪,王文飞,李德山. 人成纤维细胞生长因子-21单克隆抗体的制备及抗原表位的确定[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2013, 29(8): 834-837 |
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| 作者姓名： | 郝智超 徐黎明 白银 王琪 王文飞 李德山 |
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| 作者单位： | 东北农业大学生命科学学院生物制药教研室,黑龙江哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 东北农业大学博士启动基金 |
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| 摘 要： | 目的 制备小鼠抗人成纤维细胞生长因子(hFGF)-21单克隆抗体(mAb),通过细菌展示确定该mAb的抗原表位.方法 用hFGF-21作为检测和免疫抗原,间接ELISA筛选分泌抗人hFGF-21 mAb的杂交瘤细胞株;用FITC标记该mAb,并克隆hFGF-21的不同片段到展示载体Apex上,通过流式细胞仪筛选其抗原表位.结果 成功筛选出1株抗hFGF-21抗体的细胞株,其分泌抗体重链的亚型为IgG 2b,轻链为Kappa链;该杂交瘤细胞株腹水的效价为1:4.096×106;传30代及液氮中保存3个月,该细胞株能稳定分泌抗hFGF-21 mAb,且效价稳定;Western blot法检测证明该抗体与人FGF-21有很好的特异性;该mAb与小鼠FGF-21有交叉反应;通过流式细胞仪对抗原表位的筛选,该mAb可与hFGF-21下游的第107～121个氨基酸反应.结论 成功的制备出特异性、高稳定性的小鼠抗hFGF-21 mAb,确定了该mAb的抗原表位在第107～121位氨基酸.
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| 关 键 词： | 人成纤维细胞生长因子-21 单克隆抗体 细菌展示 流式细胞术 |
Preparation of monoclonal antibodies against hFGF-21 and identification of epitope |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hFGF-21 monoclonal antibody bacterial display FACS |
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