8种深部真菌DNA微阵列鉴定方法的建立及应用

目的 建立一种能快速鉴定临床常见8种深部真菌的DNA微阵列.方法 选取临床常见的8种真菌,包括白色假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、土曲霉、黄曲霉、烟曲霉和米根霉.利用通用引物扩增真菌ITS区,生物素标记目的基因.针对扩增靶序列的可变区段设计探针,以尼龙膜为载体,建立DNA微阵列.采用所建立的DNA微阵列对45株临床真菌分离株进行检测.结果 应用DNA微阵列技术成功地对8种临床常见真菌菌种进行了检测,检测时间可缩短至8 h.白色假丝酵母、光滑假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、米根霉、黄曲霉以及土曲霉的探针的检测特异度高,无非特异性反应;烟曲霉的检测探针与黄曲霉之间有微弱非特异性反应,但是不影响鉴定结果.45例临床真菌分离株的DNA微阵列鉴定结果与临床检出结果完全一致.结论 该研究建立的DNA微阵列技术可在8 h内快速、准确地检测临床常见深部感染真菌菌种,具备应用于临床辅助诊断的前景.

Development of a Oligonucleotide Microarray for Detection of Eight Common Deep Fungi