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人激肽释放酶腺相关病毒载体的构建及其在人脐静脉内皮细胞中的表达
引用本文:阮景明,朱鹏立,俞兆希,陈慧,李体远. 人激肽释放酶腺相关病毒载体的构建及其在人脐静脉内皮细胞中的表达[J]. 中国动脉硬化杂志, 2006, 14(4): 321-324
作者姓名:阮景明  朱鹏立  俞兆希  陈慧  李体远
作者单位:1. 福建省立医院,二内科,福建省福州市,350001
2. 福建省立医院,心内科,福建省福州市,350001
3. 深圳市人民医院,深圳市,518100
摘    要:目的研究人激肽释放酶腺相关病毒载体的构建,观察重组病毒感染人脐静脉内皮细胞株后人激肽释放酶基因的表达。方法将人激肽释放酶基因定向克隆入AAV载体质粒pAAV-MCS中,并与两种辅助质粒pAAV-RC和pHelper共转染293细胞,包装成带有人激肽释放酶基因的重组腺相关病毒(rAAV);收集病毒颗粒并测定病毒滴度。以不同滴度的病毒分别感染人脐静脉内皮细胞,逆转录聚合酶链反应定量检测人激肽释放酶在该细胞中的表达。酶联免疫吸附法测定人脐静脉内皮细胞内人激肽释放酶的含量。结果成功获得了重组人激肽释放酶基因AAV载体,重组病毒滴度为6.2×1010个/L。以滴度分别为1×109个/L、1×108个/L和1×107个/L的病毒感染人脐静脉内皮细胞,与空白对照组比较,人激肽释放酶的表达均有增加(P<0.05),但以1×109个/L组升高最明显(P<0.001)。结论带有人激肽释放酶的重组腺相关病毒滴度可以稳定地达到1010个/L以上,感染人脐静脉内皮细胞后,人激肽释放酶基因在宿主细胞中的表达明显增强。

关 键 词:分子生物学  腺相关病毒  激肽释放酶  共转染  基因治疗  高血压  脐静脉内皮细胞
文章编号:1007-3949(2006)14-04-0321-04
收稿时间:2005-04-21
修稿时间:2006-03-20

Construction of Recombinant Adeno-Associated Virus Vector and Expressing Human Tissue Kallikrein Gene and Its Delivery in Human Umbilical Vein Endothelial Cell
RUAN Jing-Ming~,ZHU Peng-Li~,YU Zhao-Xi~,CHEN Hui~,and LI Ti-Yuan~. Construction of Recombinant Adeno-Associated Virus Vector and Expressing Human Tissue Kallikrein Gene and Its Delivery in Human Umbilical Vein Endothelial Cell[J]. Chinese Journal of Arteriosclerosis, 2006, 14(4): 321-324
Authors:RUAN Jing-Ming~  ZHU Peng-Li~  YU Zhao-Xi~  CHEN Hui~  and LI Ti-Yuan~
Affiliation:1.Second Department of Internal Medicine,2.Department of Cardiovasology, Fujian Provincial Hospital,Fuzhou 350001,3.Clinical Medicine Research Center,Shenzhen Hospital,Shenzhen 518100,China
Abstract:
Keywords:Adeno-Associated Virus  Kallikrein  Co-Transfect  Gene Therapy  Hypertension  Human Umbilical Vein Endothelial Cell
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