| 慢病毒在大鼠胶质瘤细胞基因转导中的应用 |
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| 引用本文： | 林健,戴学军,王伟民,袁振华,王红梅,何新舟,刘茜,曹晖,蒋立新. 慢病毒在大鼠胶质瘤细胞基因转导中的应用[J]. 中国微侵袭神经外科杂志, 2007, 12(8): 358-362 |
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| 作者姓名： | 林健 戴学军 王伟民 袁振华 王红梅 何新舟 刘茜 曹晖 蒋立新 |
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| 作者单位： | 1. 中国人民解放军广州军区广州总医院神经外科,广东,广州,510010
2. 北京本元正阳基因技术有限公司,北京,100176 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金;军队医学科研项目 |
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| 摘 要： | 目的应用慢病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）基因转导大鼠9L胶质瘤细胞。方法构建慢病毒表达质粒pLenti6/V5-TK并以PCR、酶切及测序等方法鉴定。利用ViraPowerTM慢病毒表达系统,将重组质粒与包装混合物（Packaging Mix）共同转染293T细胞生产假病毒颗粒,转染48 h后收集培养上清,用其感染大鼠9L胶质瘤细胞,以抗稻瘟菌素（BSD）筛选出9L-TK细胞。RT-PCR、Western blot方法检测TK基因在9L-TK细胞中的表达。用MTT方法测试更昔洛韦（GCV）对体外培养的9L-TK细胞杀伤效果。结果构建的重组质粒pLenti6/V5-TK经PCR、酶切及测序鉴定正确;该质粒与包装质粒共转染293T细胞获取的慢病毒滴度达2.7×10^5转导单位（TU）/ml。经BDS筛选获得的9L-TK细胞RT-PCR及Western blot结果显示TK基因表达阳性,且GCV对该细胞作用敏感。结论成功利用慢病毒实现了TK基因转导大鼠9L胶质瘤细胞。
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 质粒 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 大鼠 神经胶质瘤 9L细胞 |
| 文章编号： | 1009-122X（2007）08-0358-05 |
| 修稿时间： | 2007-04-19 |
Application of lentivirus in gene transduction of rat Glioma cells |
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| LIN Jian, DAI Xuejun, WANG Weimin, et al. Application of lentivirus in gene transduction of rat Glioma cells[J]. Chinese Journal of Minimally Invasive Neurosurgery, 2007, 12(8): 358-362 |
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| Authors: | LIN Jian DAI Xuejun WANG Weimin et al |
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| Affiliation: | Department of Neurosurgery, Guangzhou General Hospital of Guangzhou Military Command, Guangzhou 510010, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lentiviral vectors plasmids herpes simplex viral thymidine kinase gene rats glioma 9L cell |
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