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NO体外对肠上皮细胞表达紧密连接蛋白Occludin的影响
引用本文:刘冬妍,崔巍.NO体外对肠上皮细胞表达紧密连接蛋白Occludin的影响[J].世界华人消化杂志,2007,15(21):2295-2299.
作者姓名:刘冬妍  崔巍
作者单位:1. 中国医科大学附属盛京医院检验科,辽宁省沈阳市,110004
2. 中国医科大学附属第一医院消化内科,辽宁省沈阳市,110001
摘    要:目的:探讨一氧化氮(NO)对肠上皮细胞表达紧密连接蛋白Occludin的影响,以研究NO对肠黏膜屏障的作用机制.方法:将NO的供体Sin1与肠上皮细胞株Caco-2共培养24 h,采用MTT方法观察NO对肠上皮细胞的作用,并分别提取细胞蛋白和总RNA,采用免疫蛋白印迹(Westem blot)蛋白半定量方法和实时定量聚合酶链式反应(RO-PCR)方法检测不同NO浓度对Caco-2细胞表达紧密连接蛋白Occludin蛋白和mRNA表达的影响.结果:随着Sin1浓度升高(125,250,500和1000μmol/L)NO对细胞的杀伤作用产生并逐渐增大,Occludin蛋白表达量和mRNA的相对表达量与无Sin1刺激时蛋白及mRNA的表达量相比明显降低(蛋白:375±0.5,374±0.8,363±0.3.363±0.7 vs 398±0.7;mRNA:0.689±0.01,0.578±0.09,0.554±0.03,0.619±0.04 vs 1,均P<0.01).结论:NO可直接损伤肠上皮细胞,同时以剂量依赖形式在蛋白和分子水平影响紧密连接蛋白Occludin的表达.

关 键 词:一氧化氮  Sin1  Caco-2细胞  紧密连接蛋白Occludin  免疫印迹  实时定量聚合酶链式反应
收稿时间:2007-04-17
修稿时间:2007-07-20

Effects of NO on the tight junction protein occludin in intestinal epithelial cells in vitro
Dong-Yan Liu,Wei Cui.Effects of NO on the tight junction protein occludin in intestinal epithelial cells in vitro[J].World Chinese Journal of Digestology,2007,15(21):2295-2299.
Authors:Dong-Yan Liu  Wei Cui
Abstract:
Keywords:NO  Sin1  Caco-2 cell line  Tight junction protein occludin  Western blotting  Real time polymerase chain reaction
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