| 人FcγRⅡ真核表达质粒的构建及稳定转染细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 席俊,张改平,张利娜,张红,乔松林,苗现伟,何礼洋,张乃生.人FcγRⅡ真核表达质粒的构建及稳定转染细胞系的建立[J].第二军医大学学报,2008,29(9):1110-1113. |
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| 作者姓名： | 席俊 张改平 张利娜 张红 乔松林 苗现伟 何礼洋 张乃生 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;河南省农业科学院,河南省动物免疫学重点实验室,郑州,450002
2. 河南省农业科学院,河南省动物免疫学重点实验室,郑州,450002
3. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的:建立稳定表达人FcγRⅡ(human Fc gamma receptor Ⅱ ,huFcγRⅡ)的真核细胞系,为后续研究奠定基础.方法:采用RT-PCR方法从人外周血白细胞合成FcγRⅡcDNA,构建huFcγRⅡ表达质粒pcDNA3-huFcγRⅡ,经酶切和PCR鉴定后,将pcDNA3-huFcγRⅡ质粒通过脂质体转染法转染COS7细胞,并经G418筛选获得稳定表达huFcγRⅡ的细胞克隆.采用免疫荧光法和玫瑰花环试验检测huFcγRⅡ的表达.结果:构建的pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒经酶切鉴定与预期一致,稳定转入COS7细胞后,经免疫荧光染色,约90%的转染细胞可见荧光,而未转染的COS7对照细胞未见荧光.结论:成功构建pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒,建立了稳定表达huFcγRⅡ的细胞系,为进一步研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | huFcγRⅡ受体 COS7细胞 免疫荧光检测 玫瑰花环试验 |
| 收稿时间： | 2008/2/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2008/6/12 0:00:00 |
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