单顺反子表达人GM—CSF和B7．1融合基因自核表达载体的构建和鉴定

目的 构建单顺反子表达人GM-CSF和B7．1融合基因真核表达裁体。方法 应用巨引物PCR技术对hGM-CSF基因cDNA进行定点突变；应用PCR重叠延伸法，将hGM-CSF和hB7，1基因的cDNA编码序列通过一1inker序列拼接，构建hGM-CSF与hB7．1融合基因hGM-B7．1，将其插入pcDNA3真核表达裁体，测定核苷酸序列。结果 序列分析表明：(1)hGM-CSF突变体基因cDNA编码序列的178位核苷酸由C变为A，其余核苷酸序列均未发生变化；(2)hGM-CSF、1inker、hB7.1的连接顺序、方向及序列完全正确。结论 构建pcDNA3-hGM-B7.1融合基因真核表达载体成功。