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小鼠胚胎生殖细胞的建立及其印记状态
引用本文:胡静,赵巧湜,古艳丽,白光宇,吴稀,雷蕾. 小鼠胚胎生殖细胞的建立及其印记状态[J]. 解剖学报, 2013, 44(3): 397-402. DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.03.021
作者姓名:胡静  赵巧湜  古艳丽  白光宇  吴稀  雷蕾
作者单位:1.哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室,哈尔滨 150081;2.牡丹江医学院组织学与胚胎学教研室,黑龙江 牡丹江 157011
基金项目:黑龙江省青年专项基金资助项目,黑龙江省研究生创新科研基金资助项目
摘    要:目的 成功建立小鼠胚胎生殖细胞(EGCs)系,并初步分析小鼠胚胎生殖细胞的印记状态。方法 建立交配后12.5d(12.5dpc)原始生
殖细胞 (PGCs)来源的小鼠EGCs,通过碱性磷酸酶(AKP)染色、免疫荧光细胞化学、体内分化及体外分化等方法检测EGCs的多能性,并以小鼠
胚胎干细胞(ESCs)为对照,应用Real-time PCR检测EGCs中与发育相关的Ins2、Lgf2、H19、Lgf2r等11个父源与母源印记基因的表达情况。结果
成功建立小鼠EG细胞系,EGCs克隆AKP染色显示有高水平的AKP活性,免疫荧光细胞化学方法显示克隆表达小鼠ESCs多能性标记物Oct4及细胞表面
标记SSEA-1。核型分析检测显示,小鼠EGCs为正常的40条染色体,体内可分化出3个胚层来源的组织,说明小鼠EGCs具有多能性;Real-time PCR
结果显示EGCs的印记基因表达量显著高于ESCs。结论 12.5dpc PGC来源的EGCs的印记基因处于擦除状态。

关 键 词:胚胎生殖细胞   印记基因   实时定量聚合酶链反应   小鼠
收稿时间:2012-06-08

Establishment of a mouse embryonic germ cell line and preliminary study of the expression of imprinted genes
HU Jing , ZHAO Qiao-shi , GU Yan-li , BAI Guang-yu , WU Xi , LEI Lei. Establishment of a mouse embryonic germ cell line and preliminary study of the expression of imprinted genes[J]. Acta Anatomica Sinica, 2013, 44(3): 397-402. DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2013.03.021
Authors:HU Jing    ZHAO Qiao-shi    GU Yan-li    BAI Guang-yu    WU Xi    LEI Lei
Affiliation:1.Department of Histology and Embryology, Harbin Medical University, Harbin 150081, China;; 2. Department of Histology and Embryology,Mudanjiang Medical University,  Heilongjiang Mudanjiang 157011,  China
Abstract:
Keywords:Embryonic germ cell  Imprinted gene  Real-time PCR  Mouse
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