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抗PNAS-2单链抗体对白血病U937细胞凋亡的影响
引用本文:肖珎予,陈芳源,王海嵘,吴英理,钟济华,钟华. 抗PNAS-2单链抗体对白血病U937细胞凋亡的影响[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2011, 31(4). DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.04.001
作者姓名:肖珎予  陈芳源  王海嵘  吴英理  钟济华  钟华
作者单位:1. 上海交通大学,医学院附属仁济医院血液科,上海,200127
2. 上海交通大学医学院细胞分化与凋亡教育部重点实验室,上海,200025
基金项目:仁济医院-交通大学基础医学院合作研究基金,国家自然科学基金
摘    要:
目的 观察抗PNAS-2单链抗体与PNAS-2抗原特异性结合的能力,并在此基础上探究其对急性单核细胞白血病U937细胞凋亡的影响.方法 运用反转录病毒转染法将抗PNAS-2单链抗体表达载体pMIG-PNAS-2ScFv转入U937细胞(pMIG-PNAS-2ScFv组),同时设转染pMIG空载体(NC组)及未转染载体的U937细胞(U937组)为对照.流式细胞仪检测转染效率;激光共聚焦显微镜观察单链抗体表达情况及与靶抗原特异性结合的能力;流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡;Western blotting观察PNAS-2表达及促凋亡因子caspase-3激活情况.结果 成功将抗PNAS-2单链抗体编码序列转入U937细胞,所表达的单链抗体能与PNAS-2抗原特异性结合.与NC组和U937组相比,pMIG-PNAS-2ScFv组细胞凋亡率明显上升(P<0.05),活化型caspase-3表达增加,但PNAS-2含量并无变化.结论 抗PNAS-2单链抗体能有效结合U937细胞内的PNAS-2抗原并有促进U937细胞凋亡的作用,其促凋亡机制可能与PNAS-2功能位点被封闭后功能失活而无法发挥抑凋亡作用有关.

关 键 词:单链抗体  U937细胞  凋亡

Effects of anti-PNAS-2 single chain antibody on apoptosis of human leukemic U937 cells
XIAO Zhen-yu,CHEN Fang-yuan,WANG Hai-rong,WU Ying-li,ZHONG Ji-hua,ZHONG Hua. Effects of anti-PNAS-2 single chain antibody on apoptosis of human leukemic U937 cells[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science, 2011, 31(4). DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.04.001
Authors:XIAO Zhen-yu  CHEN Fang-yuan  WANG Hai-rong  WU Ying-li  ZHONG Ji-hua  ZHONG Hua
Abstract:
Keywords:PNAS-2
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