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2型糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞中Dickkopf-1蛋白的表达水平及其与成骨活性的关系
引用本文:李嫣,刘志涛,仝昭宸,黄河清,刘振东.2型糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞中Dickkopf-1蛋白的表达水平及其与成骨活性的关系[J].中南大学学报(医学版),2018,43(9):971-981.
作者姓名:李嫣  刘志涛  仝昭宸  黄河清  刘振东
作者单位:中南大学湘雅三医院骨科,长沙 410013
摘    要:目的:检测2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)生长活性及成骨分化能力,以及Dickkopf-1(DKK-1)蛋白在BMSCs诱导成骨过程中的表达水平,探讨T2DM对 BMSCs成骨活性的影响及其与DKK-1表达的关系。方法:提取并分离T2DM造模大鼠BMSCs,进行体外培养与成骨诱 导,并将其分为T2DM组和正常对照组;采用细胞计数试剂盒检测BMSCs增殖活性;采用膜联蛋白V(annexin V)-异硫 氰酸荧光素(fl uorescein isothiocyanate,FITC)/ 碘化吡啶(propidium iodide,PI)双染法检测细胞凋亡率;采用碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,ALP)染色及ALP活性检测试剂盒检测BMSCs中ALP表达水平;采用茜素红染色与矿化结节定量法 分析BMSCs成骨分化程度;采用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR)法检测大鼠BMSCs中核心结合 因子a1(core binding factor alphal 1,Runx2)和DKK-1的表达。结果:T2DM组大鼠BMSCs增殖活性比正常对照组弱,细 胞凋亡增加(均P<0.01);BMSCs成骨诱导过程中,T2DM组大鼠ALP表达量比正常对照组显著降低,且钙结节形成减 少,Runx2表达下调(均P<0.01);T2DM组BMSCs中DKK-1蛋白和mRNA表达上调,高于正常对照组(均P<0.01);DKK-1 蛋白和mRNA表达与Runx2的表达升高有关(均P<0.01)。结论:T2DM造模大鼠BMSCs的生长活性及成骨分化潜能受 损,这可能与BMSCs中DKK-1表达升高有关。

关 键 词:2型糖尿病  骨髓间充质干细胞  Dickkopf-1蛋白  经典Wnt信号通路  成骨分化  

Expression level of Dickkopf-1 protein in bone mesenchymal stem cells in Type 2 diabetic rats and its relationship with osteogenic activity
LI Yan,LIU Zhitao,TONG Zhaochen,HUANG Heqing,LIU Zhendong.Expression level of Dickkopf-1 protein in bone mesenchymal stem cells in Type 2 diabetic rats and its relationship with osteogenic activity[J].Journal of Central South University (Medical Sciences)Journal of Central South University (Medical Sciences),2018,43(9):971-981.
Authors:LI Yan  LIU Zhitao  TONG Zhaochen  HUANG Heqing  LIU Zhendong
Institution:Department of Orthopedics, Th ird Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410013, China
Abstract:
Keywords:Type 2 diabetes mellitus  bone marrow mesenchymal stem cells  Dickkopf-1 protein  classical Wnt signaling pathway  osteogenic differentiation  
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