| 丙型肝炎病毒核心蛋白通过自诱导方式可溶性表达及其生物学功能鉴定 |
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| 引用本文： | 龚旭阳,马其欢,杜茜,胡接力,蔡雪飞,黄爱龙. 丙型肝炎病毒核心蛋白通过自诱导方式可溶性表达及其生物学功能鉴定[J]. 中华肝脏病杂志, 2013, 21(8) |
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| 作者姓名： | 龚旭阳 马其欢 杜茜 胡接力 蔡雪飞 黄爱龙 |
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| 作者单位： | 400016,重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 构建包含HCV核心蛋白全长基因的重组原核表达质粒,经转化表达型大肠杆菌后自诱导培养以获取可溶性重组核心蛋白,并检测其生物学功能. 方法 以H/FL质粒为模板,通过PCR扩增全长HCV核心蛋白DNA.PCR产物经双酶切后定向克隆到pET28a原核表达载体中.将重组的原核表达载体转化表达型大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS,并通过自诱导培养的方式使其在高浓度状态下表达重组核心蛋白.重组核心蛋白经Western blot检测鉴定生物学功能,并与HCV NS3蛋白进行相互结合后共同纯化实验. 结果 重组核心蛋白大量存在于表达菌破菌上清液中.Western blot检测结果显示其具有核心蛋白抗原性.重组核心蛋白不能单独通过Ni-NTA亲和层析柱纯化,但可以与HCV NS3蛋白结合后共同纯化. 结论 成功表达可溶性的重组核心蛋白,证明了其生物学活性.重组核心蛋白与HCV NS3蛋白存在相互作用.
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| 关 键 词： | 肝炎病毒,丙型 蛋白质类 质粒 |
The biological function of auto-induced expression of the hepatitis C virus soluble core protein |
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| GONG Xu-yang , MA Qi-huan , DU Xi , HU Jie-li , CAI Xue-fei , HUANG Ai-long. The biological function of auto-induced expression of the hepatitis C virus soluble core protein[J]. Chinese journal of hepatology, 2013, 21(8) |
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| Authors: | GONG Xu-yang MA Qi-huan DU Xi HU Jie-li CAI Xue-fei HUANG Ai-long |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Hepatitis C virus Proteins Plasmids |
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