大鼠成牙骨质细胞的体外培养及其生物学特性

目的：探讨体外培养和鉴定源于大鼠磨牙牙骨质的成牙骨质细胞(Cementoblast，CMB)的可行性，观察培养状态下CMB的形态与功能，就其是否能分泌碱性磷酸酶(Alkaline phoshatse active-ity。ALP)、骨钙素的生物学特性进行初步研究，以期建立能排除牙周其他细胞干扰的CMB体外实验模型。方法：使用组织块结合酶消化的二步法，分别培养来自牙骨质的CMB,来自牙槽骨的成骨细胞和来自牙周韧带的成纤维细胞。然后对所培养的细胞分别进行骨钙素免疫组化染色和ALP活力测定,并利用茜素红S，检测在条件培养基下细胞形成矿化结节的情况。结果：3种牙周细胞都可从约12周大鼠第一磨牙根周获得进行原代培养。骨钙素在体外培养的CMB和成骨细胞中被强烈表达，在牙周韧带成纤维细胞中几乎不表达。成骨细胞ALP活性最强，在成纤维细胞中适中，在CMB中几乎无活性。CMB形成矿化结节茜素红S染色阳性。结论：CMB可以在体外成功培养，并可与牙槽骨成骨细胞、牙周韧带的成纤维细胞相区别。