河豚毒素单用及与indoxacarb联合应用的镇痛抗炎作用

目的：观察河豚毒素单用及河豚毒素与indoxacarb联合应用的镇痛抗炎作用。方法：实验于2004-09／2005-01在北京大学医学部神经精神药理实验室完成。选择ICR小鼠240只，按随机数字表法分为24组，每组10只。①醋酸扭体实验：110只小鼠分为阴性对照组、阳性对照组（吗啡，5mg／kg）、单用河豚毒素组（0．79，0．39，0．19μg／kg）、联合给药组[河豚毒素（0．19μg／kg）＋indoxacarb（1．4，2．8，28mg／kg），河豚毒素（0．19，0．39，0．79μg／kg）＋indoxacarb（5．6mg／kg）]。给药40min后，腹腔注射致痛剂6g／L冰醋酸溶液（0．01mL／g）。观察并记录15min内小鼠扭体反应次数。扭体抑制率（％）：（阴性对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数）／阴性对照组平均扭体次数&;#215;100％。②甲醛实验：50只小鼠分为阴性对照组、阳性对照组（吗啡，5mg／kg）、单用河豚毒素组（0．19μg／kg）、联合给药组[河豚毒素（0．19μg／kg）＋indoxacarb（1．4，2．8mg／kg）]。给药40min后，小鼠右后足背皮下注射致痛剂9．2g／L甲醛（生理盐水配制）20μL／只。将小鼠舔、咬右爪的时间长度作为疼痛反应的指标。观察并记录0～5min，15～30min反应时间。抑制率（％）=（阴性对照组平均反应时间-给药组平均反应时间）／阴性对照组平均反应时间&;#215;100％。注射甲醛4h后，将小鼠断头处死，之后自膝关节切脚，称重，比较左右足差异，以此代表炎症程度。③坐骨神经慢性轻度结扎损伤实验：80只小鼠分为阴性对照组、阳性对照组（吗啡，5mg／kg）、单用河豚毒素组（0．19，0．39，0．79μg／kg）、联合给药组[河豚毒素（0．19μg／kg）＋indoxacarb（1．4，2．8．5．6mg／kg）]。75mg／kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠。用细铜丝在坐骨神经上结扎2次。在术前及术后第1，3，5，7，9，11，13天测定热板潜伏期。第15天给药后15，30，45，60min测定小鼠热板潜伏期。结果：纳入动物240只，均进入结果分析。①单独使用河豚毒素（0．19，0．39，0．79μg／kg），扭体抑制率分别为22．2％，3113％，39．2％，其抑制率与浓度存在剂量依赖关系。将河豚毒素（0．19μg／ks）与不同浓度的indoxacarb联合给药发现，扭体抑制率均显示升高趋势，达到38．6％，46．1％，50．6％，65．3％。②在早期（0～5min），单独使用河豚毒素（0．19μg／kg）能够减少小鼠舔脚时间，河豚毒素与indoxcarb（1．4，2．8mg／kg）两者联合给药显著减少小鼠舔脚时间，抑制率达到49.3％，50．2％，与吗啡的镇痛强度相差不多（抑制率为57．5％）。在晚期（15～30min），单独使用河豚毒素（0．19μg／kg）能够显著减少小鼠舔脚时间，将河豚毒素与indoxacarb（1．4，2．8mg／kg）两者联合给药，其作用极其显著，抑制率高达97．2％，92．4％，远远超过吗啡的镇痛强度（抑制率为79．7％）。③单独使用河豚毒素（0．19μg／kg）能够显著增强抗炎活性，抑制率为66．3％；将河豚毒素（0．19μg／kg）＋indoxacarb（1．4，2．8mg／kg）两者联合用药，其作用极其显著，抑制率高达75_2％，124．2％，远远超过吗啡的抗炎活性（抑制率仅为28．7％），而吗啡与阴性对照组相比差异无显著性意义。④单独使用河豚毒素（0．19μg／kg）能够显著增强热板潜伏期的变化率（P〈0．05），能显著缓解结扎坐骨神经引起的小鼠痛觉过敏现象。将河豚毒素（0．19μg／kg）＋indoxacarb（1．4，2．8，5．6mg／kg）两者联合用药，未看到显著的热板潜伏期的变化。结论：河豚毒素具有一定镇痛作用，能够抑制甲醛引起炎症性疼痛和水肿；河豚毒素联合小剂量indoxacarb具有协同镇痛抗炎作用。

Analgesic and anti-inflammatory effects of tetrodotoxin alone and tetrodotoxin combined with indoxacarb