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细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用
引用本文:刘英鹏,田蕾,王国鹏,王建亭,李泽文,罗凌惠,龚树生. 细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用[J]. 华中科技大学学报(医学版), 2007, 36(4): 548-550
作者姓名:刘英鹏  田蕾  王国鹏  王建亭  李泽文  罗凌惠  龚树生
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院,耳鼻咽喉科,武汉,430022
2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院,血液科,武汉,430022
3. 首都医科大学附属同仁医院耳鼻咽喉科,北京,100730
摘    要:目的通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒。方法质粒pAdTrack酶切线性化后,通过电转化方法转化AdEasier细菌,线性化的腺病毒重组质粒转染293包装细胞后获得重组腺病毒,观察腺病毒感染喉癌细胞Hep-2后的报告基因表达情况及病毒对培养细胞生长的影响。结果构建的重组腺病毒经酶切电泳鉴定正确;扩增的腺病毒转染培养的Hep-2细胞8 h后即开始表达报告基因,48 h后全部细胞均有报告基因表达;该重组的腺病毒对培养Hep-2细胞生长无明显影响。结论通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒,方法简单、成功率高、实验周期短。

关 键 词:腺病毒载体  细菌内同源重组  基因转移
修稿时间:2005-07-11

Construction of Recombinant Adenovirus by Homologous Recombination in Bacteria
Liu Yingpeng , Tian Lei , Wang Guopeng et al. Construction of Recombinant Adenovirus by Homologous Recombination in Bacteria[J]. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences), 2007, 36(4): 548-550
Authors:Liu Yingpeng    Tian Lei    Wang Guopeng et al
Affiliation:1.Department of Otolaryngology; 2.Department of Hematology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022
Abstract:
Keywords:adenovirus vector   homologous recombination in bacteria   gene transfer
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