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单核细胞趋化因子1发卡环RNA真核表达载体的构建
引用本文:张雪松,马胜忠,王岩,侯铁胜. 单核细胞趋化因子1发卡环RNA真核表达载体的构建[J]. 中国临床康复, 2006, 10(28): 94-96
作者姓名:张雪松  马胜忠  王岩  侯铁胜
作者单位:[1]解放军总医院骨科,北京市100853 [2]解放军济南军区总医院骨科,山东省济南市250031 [3]解放军第二军医大学长海医院骨科,上海市200433
摘    要:
目的:构建单核细胞趋化因子1发卡环RNA真核表达载体。方法:实验于2002—10/2003-05在解放军第二军医大学中心实验室完成。①单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段合成。(2)将发卡小分子干扰RNA克隆人质粒pSilencer产生重组质粒SiRNA—pSilencer-单核细胞趋化因子1。③分别用BamHⅠ和HindⅢ酶切鉴定,随机分为1,2样本,每份样本进行10次电泳,并且采用460bpi标准参照样。④将经酶切鉴定后的重组质粒作测序分析。结果:①单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段被成功克隆进pSilencer-U6质粒中。②BamHⅠ和HindⅢ酶切鉴定可切出450bpi大小的片段,结果表明样本1,2均与参照以及marker相一致,从片段大小的角度初步确定酶切的准确。③DNA测序分析显示,重组质粒小分子干扰RNA编码序列与设计片段的序列完全一致。结论:针对单核细胞趋化因子1发卡小分子干扰RNA片段的真核表达载体SiRNA—pSilencer-单核细胞趋化因子1的成功构建,为进一步研究其基因功能打下了基础。

关 键 词:RNA,小分子干扰 单核细胞化学吸引蛋白质 遗传载体 质粒
收稿时间:2006-04-20
修稿时间:2006-05-13

Construction of eukaryotic expression vector of monocyte chemoattactant peptide-1 small interfering RNA
Zhang Xue-song, Ma Sheng-zhong, Wang Yan, Hou Tie-sheng .. Construction of eukaryotic expression vector of monocyte chemoattactant peptide-1 small interfering RNA[J]. Chinese Journal of Clinical Rehabilitation, 2006, 10(28): 94-96
Authors:Zhang Xue-song   Ma Sheng-zhong   Wang Yan   Hou Tie-sheng .
Affiliation:1Department of Orthopedics, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China; 2Department of Orthopedics, General Hospital of Jinan Military Area Command of Chinese PLA, Jinan 250031, Shandong Province, China; 3Department of Orthopedics, Changhai Hospital, Second Military Medical University of Chinese PLA, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:
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