| 一种简便高效利用重叠延伸PCR进行基因定点突变的方法 |
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| 引用本文： | 苏燕,邵国,高嵩单,于明华,修瑞娟. 一种简便高效利用重叠延伸PCR进行基因定点突变的方法[J]. 包头医学院学报, 2007, 23(6): 559-560 |
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| 作者姓名： | 苏燕 邵国 高嵩单 于明华 修瑞娟 |
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| 作者单位： | 包头医学院生物化学与分子生物学教研室,内蒙古,包头,014010;中国协和医科大学中国医学科学院微循环研究所 |
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| 基金项目： | 中国科学院知识创新工程项目 |
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| 摘 要： | ![]()
目的:建立一种简便快速的重叠延伸PCR基因定点突变方法.方法:采用重叠延伸PCR的方法将人TGF-β2基因启动子区(-270bp～ 280bp)-114bp的5'CGTG3'序列定点突变为5'TTTG3',前两次PCR反应产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后无需纯化,直接将胶条切下置于EP管中,-80℃冷冻10min,然后将胶条离心后分别取上清液作为模板进行第三次PCR,以获得全长的突变目的基因,最后将此突变基因插入报告载体pGL3-Basic进行基因测序.结果:人TGF-β2基因启动子区突变序列的测序结果与预期完全一致.结论:此方法简便经济、突变准确,是一种非常实用的基因定点突变方法.
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| 关 键 词： | 重叠延伸PCR 基因突变 基因测序 |
| 收稿时间： | 2007-05-20 |
| 修稿时间： | 2007-05-20 |
A Simple, Fast and Efficient Site-directed Mutagenesis Method with Over-extention PCR |
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| SU Yan,SHAO Guo,GAO Songdan,YU Minghua,XIU Ruijuan. A Simple, Fast and Efficient Site-directed Mutagenesis Method with Over-extention PCR[J]. Journal of Baotou Medical College, 2007, 23(6): 559-560 |
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| Authors: | SU Yan SHAO Guo GAO Songdan YU Minghua XIU Ruijuan |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Overlap - extention PCR Mutagenesis Gene sequencing |
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