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缺氧诱导胶质瘤细胞肿瘤干样细胞形成体外初步研究
引用本文:汪攀,赵秀文,兰川,吴南. 缺氧诱导胶质瘤细胞肿瘤干样细胞形成体外初步研究[J]. 第三军医大学学报, 2015, 37(7): 616-622
作者姓名:汪攀  赵秀文  兰川  吴南
作者单位:400038重庆,第三军医大学西南医院神经外科,全军神经外科研究所,全军神经创伤防治重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(81272784)~~
摘    要:目的 通过体外研究初步探讨缺氧可以诱导胶质瘤细胞逆分化形成肿瘤干样细胞.方法 ①采用CD133+细胞免疫磁珠分选法分离胶质瘤细胞得到CD133-细胞群.②缺氧处理CD133-细胞48 h后行免疫荧光染色鉴定肿瘤干细胞样标记蛋白(SOX2,OCT-4,KLF-4,Nanog,CD133)表达情况,并分别缺氧处理0、3、6、9、12、24 h及0、12、24、48、72 h行qRT-PCR及Western blot检测.流式细胞术检测胶质瘤细胞缺氧培养后CD133+细胞比例变化,检测时间为缺氧培养1、3、5、7d.③缺氧处理胶质瘤细胞1、3、5、7d后流式分析细胞周期及凋亡改变.结果 ①荧光检测结果表明,肿瘤干细胞样标记蛋白在CD133-胶质瘤细胞缺氧处理48 h后高表达;qRT-PCR及Western blot检测结果表明,缺氧处理胶质瘤细胞可以明显上调肿瘤干细胞样蛋白表达(P<0.05),其中qRT-PCR显示SOX-2,OCT-4及Nanog最高表达在缺氧后9h,KLF-4及CD133在缺氧后12h表达最高.Westem blot蛋白检测显示OCT-4最高表达在缺氧后12 h,CD133表达最高在缺氧24h后,KLF-4及Nanog最高表达则在缺氧48 h后,SOX-2在缺氧72 h后表达量最高.另外随着缺氧时间的延长,CD133+细胞数比例逐渐升高(P<0.05).②细胞周期结果提示缺氧处理肿瘤细胞后,Go/G1期延长,G2/M+S缩短(P<0.05);凋亡结果提示常氧培养组更易凋亡(P<0.05).结论 缺氧可以诱导CD133-胶质瘤细胞肿瘤干样细胞形成.

关 键 词:缺氧  胶质瘤  肿瘤干样细胞

Hypoxia induces cancer stem-like cells from glioma cells
Wang Pan , Zhao Xiuwen , Lan Chuan , Wu Nan. Hypoxia induces cancer stem-like cells from glioma cells[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2015, 37(7): 616-622
Authors:Wang Pan    Zhao Xiuwen    Lan Chuan    Wu Nan
Affiliation:Wang Pan;Zhao Xiuwen;Lan Chuan;Wu Nan;Institute of Neurosurgery,Key Laboratory of Neurotrauma Prevention and Treatment,Southwest Hospital,Third Military Medical University;
Abstract:
Keywords:hypoxia  glioma  cancer stem-like cells
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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