| 应用聚合酶链反应-寡核苷酸探针快速检测结核菌耐药基因突变 |
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| 引用本文： | 吴雪琼,梁建琴,曹立雪,李洪敏,张俊仙,陆阳.应用聚合酶链反应-寡核苷酸探针快速检测结核菌耐药基因突变[J].中华检验医学杂志,2005,28(3):310-312. |
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| 作者姓名： | 吴雪琼 梁建琴 曹立雪 李洪敏 张俊仙 陆阳 |
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| 作者单位： | 100091,北京,解放军第三○九医院结核病中心研究室 |
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| 基金项目： | 军队医学杰出中青年人才科研基金项目(01J020) |
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| 摘 要： | 目的应用聚合酶链反应(PCR)-寡核苷酸探针快速检测结核菌耐药基因突变，建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验、PCR-单链构象多态性和PCR-直接测序方法为对照，对利福平、链霉素(SM)和乙胺丁醇耐药的结核菌基因rpoB、rpsL、ITS和embB的寡核苷酸探针，通过反向斑点杂交检测78株结核菌临床分离株PCR产物。结果18株结核菌药物敏感株的4种耐药基因均为野生型。60株结核菌耐药分离株中，59株为耐RFP株，rpoB基因突变率为93．2％，最常见的突变位点为531位和526位密码子，33株为耐SM株，rpsL基因突变率为75．8％，均为43位密码子AAD AGG突变，ITS基因突变率为9．1％，均为513位A→C突变，rpsL和ITS基因总突变率为84．8％；43株为耐EMB株，embB基因突变率为58．1％，均为306位密码子突变。结论应用PCR一寡核苷酸探针反向斑点杂交技术可简便、快速、准确地分析大多数结核菌耐药基因突变，检测其耐药性。
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| 关 键 词： | 结核菌 突变 耐药基因 寡核苷酸探针 快速检测 聚合酶链反应 药敏试验 密码子 PCR产物 rpsL基因 |
| 修稿时间： | 2004年3月27日 |
Rapid detection of mutations of drug-resistant genes in Mycobacterium tuberculosis by PCR-oligonucleotide probes |
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| WU Xue-qiong,LIANG Jian-qin,CAO Li-xue,LI Hong-min,ZHANG Jun-xian,LU Yang.Rapid detection of mutations of drug-resistant genes in Mycobacterium tuberculosis by PCR-oligonucleotide probes[J].Chinese Journal of Laboratory Medicine,2005,28(3):310-312. |
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| Authors: | WU Xue-qiong LIANG Jian-qin CAO Li-xue LI Hong-min ZHANG Jun-xian LU Yang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Polymerase chain reaction Oligonucleotide probes Mycobacterium tuberculosis Genes |
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