荜茇明碱抑制BMP2/pSmad1/5信号减轻高钙高磷诱导的主动脉瓣膜间质细胞钙化

目的：探究荜茇明碱对高钙高磷诱导的主动脉瓣膜间质细胞（aortic valve interstitial cell，AVIC）钙化的保护作用及其机制。方法：体外培养原代猪AVIC，通过高钙高磷诱导钙化并给予不同浓度荜茇明碱处理16 h后，流式细胞仪分析检测凋亡水平；AVIC在高钙高磷条件下，以2.5 mmol/L荜茇明碱或100 ng/mL骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein 2，BMP2）处理，通过检测钙浓度、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性、茜素红染色反映钙化程度；Western blot、real?time PCR检测成骨相关蛋白和mRNA的表达。结果：①流式细胞分析发现，高钙高磷条件下，荜茇明碱低于5 mmol/L无明显促凋亡作用；②钙浓度、ALP活性、茜素红染色显示，2.5 mmol/L荜茇明碱显著抑制高钙高磷诱导的AVIC钙化；③Western blot、real?time PCR显示，2.5 mmol/L荜茇明碱抑制BMP2、pSmad1/5、RUNX2蛋白和mRNA的表达；④外源性重组BMP2可逆转荜茇明碱抗钙化的作用。结论：荜茇明碱通过抑制 BMP2/pSmad1/5/RUNX2 信号，减轻高钙高磷诱导的 AVIC钙化。

Piperlongumine attenuates high calcium/phosphate induced aortic valve interstitial cell calcification by inhibiting BMP2/pSmad1/5 signalingDepartment of Cardiology,the First Affiliated Hospital of NMU,Nanjing 210029,China