乙型肝炎病毒S与GM-CSF融合基因在HepG2细胞中的表达

目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)对乙型肝炎DNA疫苗的免疫增强作用。方法采用PCR方法，扩增乙型肝炎S基因约680bp的片段和GM—CSF(包括甘氨酸接头)基因450bp的片段。通过基因定向克隆技术，构建融合基因真核表达质粒pcDNA3．1-S-GM-CSF，并在HepG2细胞中表达。结果经酶切、PCR及DNA测序鉴定，融合基因表达质粒pcDNA3．1-S-GM-CSF成功构建。将其转染HepG2细胞后，RT-PCR检测目的基因的转录，表达的融合蛋白能与抗-HBs、抗-GM-CSF单克隆抗体(mAbs)均产生特异性反应。结论融合基因表达载体pcDNA3．1-s-GM-CSF的成功构建并表达，为进一步研究乙型肝炎融合基因疫苗奠定了一定实验基础。