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应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白
引用本文:杨艳杰,成军,陈东风,钟彦伟,张忠东,王建军,刘妍.应用噬菌体展示技术筛选乙型肝炎病毒表面抗原基因启动子Ⅱ结合蛋白[J].解放军医学杂志,2004,29(1):23-26.
作者姓名:杨艳杰  成军  陈东风  钟彦伟  张忠东  王建军  刘妍
作者单位:1. 400042,重庆,第三军医大学大坪医院
2. 解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心
基金项目:国家自然科学基金 (编号C0 30 1 1 4 0 2、C30 0 70 689),军队回国留学人员启动 基金(编号 98H0 38),军队“十五”科技攻关青年基金 (编号 0 1Q1 38),军队“十五”科技攻关面上项目 (编号 0 1MB1 35)资助课题
摘    要:目的 通过筛选乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因启动子Ⅱ(SPⅡ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径。方法 应用噬菌体展示技术,以HBV的表面抗原基因启动子Ⅱ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析。结果 噬菌体经富集后,从随机筛选的20个克隆中得到4个阳性克隆,成功构建了克隆载体。序列测定后经过同源性分析,确定了和HBV SPⅡ结合的肝细胞蛋白——尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶4(NADHDH4)。结论 用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了HBV SPⅡ的结合蛋白,分析了该蛋白的编码基因,为进一步研究HBV的复制、转录、调节机制开辟了新的徐径。

关 键 词:噬菌体展示技术  肝炎病毒  乙型  抗原  表面  启动区(遗传学)  筛选
修稿时间:2003年4月2日

Screening of binding protein of surface protein promoter Ⅱ DNA of hepatitis B virus by phage display from human liver cDNA library
YANG Yan-jie,CHENG Jun,CHEN Dong-feng et al.Screening of binding protein of surface protein promoter Ⅱ DNA of hepatitis B virus by phage display from human liver cDNA library[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2004,29(1):23-26.
Authors:YANG Yan-jie  CHENG Jun  CHEN Dong-feng
Institution:YANG Yan-jie,CHENG Jun,CHEN Dong-feng et al. Daping Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400042,China
Abstract:
Keywords:phage display  hepatitis B virus  antigens  surface  promoter regions (genetics)  screening
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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