紫色悬钩子提取物对TNF-α诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的影响

目的 利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导培养建立及鉴定3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型，探讨紫色悬钩子提取物对胰岛素抵抗的影响。方法 采用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、地塞米松(Dex)、胰岛素联合诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞，分别与0,2,5,10,15,20 ng·mL^-1 TNF-α共孵育24,48,72,96 h; MTT法检测紫色悬钩子提取物和TNF-α对3T3-L1脂肪细胞活力的影响；油红O染色观察细胞形态的变化；Western Blot检测Akt、p-Akt蛋白表达水平；流式细胞术检测细胞对2-NBDG的摄取。结果 TNF-α浓度大于等于10 ng·mL^-1,诱导时间大于等于72 h能够显著降低胰岛素刺激后p-Akt的表达(P<0.01),产生胰岛素抵抗；胰岛素刺激后，与模型组相比，紫色悬钩子提取物都能够不同程度提高细胞中p-Akt的表达和对2-NBDG的摄取能力，其中Fr.3作用最显著(P<0.05)。结论 TNF-α诱导培养可以成功建立胰岛素抵抗细胞模型，紫色悬钩子提取物具有改善...