| 人cGAS 基因启动子的克隆鉴定及功能初探 |
| |
| 引用本文： | 陈海燕,徐妍妍,周国平,徐华国.人cGAS 基因启动子的克隆鉴定及功能初探[J].南京医科大学学报,2019(6):856-861. |
| |
| 作者姓名： | 陈海燕 徐妍妍 周国平 徐华国 |
| |
| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院检验学部，江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210029,南京医科大学第一附属医院检验学部，江苏 南京 210029 |
| |
| 基金项目： | 江苏省自然科学基金面上项目（SBK 2018022334）；江苏省研究生科研创新项目（KYCX17_1287） |
| |
| 摘 要： | 目的：构建人环鸟苷酸?腺苷酸合成酶（cyclic guanosine monophosphate?adenosine monophosphate synthase，cGAS）基因启动子，确认其活性，进而对转录调控机制进行初步探究。方法：采用 PCR 方法扩增人cGAS 基因 5′上游 1 254 bp（-1 178~+76 bp）的片段，酶切后连接到pGL3?basic 质粒，以该质粒为模板合成不同长度的启动子质粒。通过双荧光素酶报告基因实验验证不同质粒在Hela细胞中的活性，利用生物信息学方法预测启动子区存在的转录因子结合位点。通过点突变实验验证潜在的转录因子结合位点。结果：人cGAS启动子质粒初步构建成功。转染后，cGAS 启动子重组质粒的相对荧光素酶活性增加（P＜0.05）。人cGAS近端启动子区域（-414~+76 bp）经生物信息学软件分析可能含有 Sp1、CREB、USF1、RAP1、C?JUN、OCT?1等转录因子的结合位点。点突变实验证实Sp1、CREB正向调控该启动子区域。结论：人cGAS近端启动子区域（-414~+76 bp）存在较强的启动子活性，该区域含有多个潜在的转录因子结合位点。转录因子Sp1、CREB调控人cGAS启动子区。
|
| 关 键 词： | 环鸟苷酸?腺苷酸合成酶 启动子 转录调控 |
| 收稿时间： | 2019/1/13 0:00:00 |
Cloning and characterization of human cGAS gene promoter |
| |
| Chen Haiyan,Xu Yanyan,Zhou Guoping and Xu Huaguo.Cloning and characterization of human cGAS gene promoter[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2019(6):856-861. |
| |
| Authors: | Chen Haiyan Xu Yanyan Zhou Guoping and Xu Huaguo |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
|
| 点击此处可从《南京医科大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《南京医科大学学报》下载免费的PDF全文 |
