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利用干细胞筛选中药神经保护作用活性成分的新方法
引用本文:谭睿,赵骞,卢琼,马晓玲,李金圣,蔡少青.利用干细胞筛选中药神经保护作用活性成分的新方法[J].世界科学技术-中医药现代化,2019,21(4):565-572.
作者姓名:谭睿  赵骞  卢琼  马晓玲  李金圣  蔡少青
作者单位:西南交通大学生命科学与工程学院/医学院 成都 610031,西南交通大学生命科学与工程学院/医学院 成都 610031;北京大学药学院 北京 100191,西南交通大学生命科学与工程学院/医学院 成都 610031,西南交通大学生命科学与工程学院/医学院 成都 610031,西南交通大学生命科学与工程学院/医学院 成都 610031,北京大学药学院 北京 100191
基金项目:国家科技部重点研发计划(2018YFC1706200):中医药现代化研究“常用中药活性成分的合成生物学研究,负责人:谭仁祥;四川省中医药管理局建设专项(2018C031):中藏药大健康产品开发创新团队,负责人:谭睿。
摘    要:目的:利用干细胞构建可用于药物筛选的细胞模型,初步建立寻找中药活性成分的新方法。方法:首先,克隆神经生长因子(NGF)启动子的序列,连接到含有荧光素酶报告基因/E2红色荧光蛋白的质粒上,并将合成得到的质粒转入HEK-293细胞中,构建基于启动子的初步筛选稳定的细胞模型。使用阳性药进行验证细胞模型的准确性,并用该模型筛选来自中药的小分子化合物。然后使用筛选得到的化合物诱导大鼠的骨髓间充质干细胞,检测相关神经营养因子的转录水平,验证待测小分子化合物可能对神经生长的生物活性。结果:来自中药益智的三种化合物,白杨素、圆柚酮和杨芽黄素均可以激活NGF启动子。白杨素、圆柚酮诱导MSC不同时间后,细胞表面神经标志物:神经生长因子(NGF)、半乳糖神经酰胺(GalC)、巢蛋白(Nestin)、神经元特异烯醇化酶(NSE)、波形蛋白(Vimentin)对应RNA的转录水平均有不同程度的提高。而杨芽黄素没有明确促进神经细胞分化的活性。结论:白杨素、圆柚酮可以促进干细胞向神经细胞分化,是中药益智发挥神经保护作用物质基础的组成部分。

关 键 词:骨髓间充质干细胞  白杨素  圆柚酮  神经生长因子  药物筛选

A New Method for Screening Active Ingredients of Neuroprotection in Traditional Chinese Medicine by Using Stem Cells
Tan Rui,Zhao Qian,Lu Qiong,Ma Xiaoling,Li Jinsheng and Cai Shaoqing.A New Method for Screening Active Ingredients of Neuroprotection in Traditional Chinese Medicine by Using Stem Cells[J].World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine,2019,21(4):565-572.
Authors:Tan Rui  Zhao Qian  Lu Qiong  Ma Xiaoling  Li Jinsheng and Cai Shaoqing
Institution:School of Life Science and Engineering, College of Medicine, Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031, China,School of Life Science and Engineering, College of Medicine, Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031, China;School of Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 100191, China,School of Life Science and Engineering, College of Medicine, Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031, China,School of Life Science and Engineering, College of Medicine, Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031, China,School of Life Science and Engineering, College of Medicine, Southwest Jiaotong University, Chengdu 610031, China and School of Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 100191, China
Abstract:
Keywords:BMSCs  chrysin  nootkatone  NGF  drug screening
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