| CD80鼠-人嵌合抗体的CHO细胞表达及体外生物学功能的初步研究 |
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| 引用本文： | 徐耀瑜,胡玲玲,陈永井,程钢,罗先富,孙杰,刘玉华,王艳茹,陈明心,邱玉华. CD80鼠-人嵌合抗体的CHO细胞表达及体外生物学功能的初步研究[J]. 中国免疫学杂志, 2009, 25(2) |
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| 作者姓名： | 徐耀瑜 胡玲玲 陈永井 程钢 罗先富 孙杰 刘玉华 王艳茹 陈明心 邱玉华 |
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| 作者单位： | 苏州大学医学生物技术研究所,苏州,215007 |
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| 基金项目： | 江苏省高校高新技术产业发展项目，江苏省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:CHO细胞表达抗人CD80鼠-人嵌合抗体ch4E5,并研究其在体外阻断CD80介导的共刺激信号转导的生物学功能.方法:构建含有嵌合重、轻链基因的表达载体pIRES/ch4E5;表达载体先转染293T细胞,FCM检测到ch4E5抗体的瞬时表达后,表达载体再转染CHO细胞,构建稳定表达细胞株CHO-ch4E5;Protein G亲和层析法从CHO-ch4E5细胞无血清培养上清中纯化ch4E5抗体,FCM检测ch4E5抗体对膜型CD80的识别;以丝裂霉素处理的正常人外周血单核细胞PBMCs为刺激细胞,以异体正常人外周血淋巴细胞PBLs为反应细胞,用MTT法分析ch4E5抗体的阻断作用.结果:ch4E5抗体在293T细胞的瞬时表达于48小时达到高峰,上清与L929-B7-1细胞结合率为96.0%;CHO-ch4E5细胞持续表达ch4E5抗体,其培养上清与L929-B7-1细胞结合率为95.7%;3天培养上清中,ch4E5抗体的产率约为5.56 mg/L;ch4E5抗体和L929-B7-1、Daudi、Sub-T细胞结合率分别为94.1%、25.7%、23.5%;ch4E5抗体可以阻断CD80介导的共刺激信号转导,抑制异体PBLs的体外增殖.结论:在CHO细胞中成功表达了抗人CD80鼠-人嵌合抗体ch4E5,在体外该嵌合抗体具有亲本抗体阻断CD80介导的共刺激信号的生物学活性.
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| 关 键 词： | 嵌合抗体 瞬时表达 稳定表达 阻断作用 |
Expression of human-mouse chimeric antibody against CD80 in CHO cells and preliminary study on the biological activity in vitro |
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| XU Yao-Yu,HU Ling-Ling,CHEN Yong-Jing,CHENG Gang,LUO Xian-Fu,SUN Jie,LIU Yu-Hua,WANG Yan-Ru,CHEN Ming-Xin,QIU Yu-Hua. Expression of human-mouse chimeric antibody against CD80 in CHO cells and preliminary study on the biological activity in vitro[J]. Chinese Journal of Immunology, 2009, 25(2) |
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| Authors: | XU Yao-Yu HU Ling-Ling CHEN Yong-Jing CHENG Gang LUO Xian-Fu SUN Jie LIU Yu-Hua WANG Yan-Ru CHEN Ming-Xin QIU Yu-Hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CD80 |
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