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| 血管生成素1基因重组腺病毒载体的构建及其促血管形成作用 | |
| 引用本文： | 孙凌,谢宇锋,杨吉成,杨向军,盛伟华,贾红亮,吕海涛.血管生成素1基因重组腺病毒载体的构建及其促血管形成作用[J].中华生物医学工程杂志,2011,17(4). |
| 作者姓名： | 孙凌 谢宇锋 杨吉成 杨向军 盛伟华 贾红亮 吕海涛 |
| 作者单位： | 1. 苏州大学附属儿童医院心内科,215003 2. 苏州大学基础医学系细胞与分子生物教研室 3. 苏州大学附属第一医院心内科 |
| 基金项目： | 江苏省自然科学基金(BK2007058):江苏省卫生厅项目 |
| 摘 要： | 目的 构建携带人血管生成素1(Ang-1)基因的腺病毒表达载体，并观察其感染QBI-293A靶细胞后目的基因的表达及其促血管新生的效应。方法 以骨髓细胞总RNA为模板，RT-PCR扩增Ang-1基因片段，于BglⅡ、Sal Ⅰ酶切位点亚克隆至pAdTrack-CMV，构建pAdTrack-CMV-Ang-1重组转移质粒。然后pAdTrack-CMV-Ang-1重组转移质粒与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒同源重组后，再经QBI-293A细胞包装、扩增和纯化获得高滴度的Ad-Ang-1重组腺病毒。RT-PCR和ELISA检测腺病毒介导的外源性Ang-1基因在QBI-293A细胞中的转录和表达。将鸡胚随机分成3组：Ad-Ang-1重组腺病毒组、Ad空载体腺病毒组、生理盐水(NS)组，观察鸡胚绒毛膜尿囊膜(CAM)新生血管形成。结果获得了高滴度的Ad-Ang-1重组腺病毒，其病毒效价可达3×1010 pfu/ml。Ad-Ang-1感染后，QBI-293A细胞中的Ang-1含量(47522.53±3685.57) ng/L较QBI-293A细胞对照组(2490.86±550.95) ng/L和Ad空病毒感染组(2323.20±260.55) ng/L均明显升高，差异有统计学意义(P＜0.01)。Ad-Ang-1重组腺病毒组有效地促进了二、三级分支血管的生成。结论 成功获得了携带人Ang-1基因的腺病毒表达载体，为进一步开展Ang-1基因修饰干细胞的应用研究奠定了实验基础。 |
| 关 键 词： | 血管生成素1 腺病毒 基因载体 构建 血管形成 |
Construction and angiogenic effects of recombinant adenovtral vector expressing human angiopoietin 1 |
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| SUN Ling,XIE Yu-feng,YANG Ji-cheng,YANG Xiang-jun,SHENG Wei-hua,JIA Hong-liang,L Hai-tao.Construction and angiogenic effects of recombinant adenovtral vector expressing human angiopoietin 1[J].Chinese Journal of Biomedical Engineering,2011,17(4). | |
| Authors: | SUN Ling XIE Yu-feng YANG Ji-cheng YANG Xiang-jun SHENG Wei-hua JIA Hong-liang L Hai-tao |
| Institution: | SUN Ling,XIE Yu-feng,YANG Ji-cheng,YANG Xiang-jun,SHENG Wei-hua,JIA Hong-liang,L(U) Hai-tao |
| Abstract: | |
| Keywords: | Angiopoietin-1 Adenovirus Gene vector Construction Angiogenesis |
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