| 反义RNA技术对抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因表达的研究 |
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| 引用本文： | 吴琼,黄文涛,黄怡,徐恒.反义RNA技术对抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因表达的研究[J].中华肿瘤防治杂志,2013,20(4):241-244. |
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| 作者姓名： | 吴琼 黄文涛 黄怡 徐恒 |
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| 作者单位： | 1. 广西医科大学病理学教研室,广西南宁,530021
2. 广西医科大学医学实验中心,广西南宁,530021 |
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| 摘 要： | 目的:应用反义RNA技术抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因的表达,探索采用该技术干预肝癌的可行性。方法:制备人POLD1基因的反义RNA表达质粒,同时建立空白对照组与阴性对照组,由此将实验分为阴性对照组(转染空载体的SMMC-7721细胞)、空白对照组(肝癌细胞SMMC-7721)和实验组(转染人POLD1基因反义RNA表达质粒的肝癌SMMC-7721细胞)3组。MTT实验分析细胞增殖变化,并在转染SMMC-7721细胞48h后,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测POLD1基因的表达。结果:MTT实验显示,与空白对照和阴性对照组相比,转染了反义RNA的实验组细胞增殖受到明显抑制。在转染后24～72h,实验组吸光度24h为0.306 7±0.015 4,48h为0.459 2±0.033 2,72h为0.567 1±0.061 1,与空白和阴性对照组相比,P值均<0.05。实时荧光定量PCR实验显示,实验组POLD1的mRNA表达明显下调为0.142 5±0.020 5,阴性对照组为1.017±0.188,空白对照组为1.00±0.00(F=26.5,P<0.05),说明POLD1基因表达受抑制。蛋白质印迹实验显示,POLD1基因蛋白水平(p125)变化趋势与mRNA相同,均为下调,其中实验组为0.222 3±0.009 7,阴性对照组为0.237 9±0.005 9,空白对照组为0.235 4±0.003 4(F=1 365.754,P值均<0.05),说明反义RNA可抑制p125蛋白表达,结论与基因水平趋势一致。结论:针对POLD1基因设计的反义RNA体外抑制了肝癌细胞SMMC-7721的增殖,这与POLD1在基因和蛋白水平的表达下调有关。
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| 关 键 词： | 肝肿瘤 POLD1 反义RNA 基因表达 |
Inhibition of POLD1 gene by RNA antisense in the human liver cancer cell line SMMC-7721 |
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| WU Qiong,HUANG Wen-tao,HUANG Yi,XU Heng.Inhibition of POLD1 gene by RNA antisense in the human liver cancer cell line SMMC-7721[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2013,20(4):241-244. |
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| Authors: | WU Qiong HUANG Wen-tao HUANG Yi XU Heng |
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| Institution: | Guangxi Medical University,Nanning 530021,P.R.China |
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| Abstract: | |
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