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人内皮抑素在毕赤酵母中的组成型表达及其活性检测
引用本文:梁丽敏,李校坤,苏志坚,黄亚东,吴晓萍,郑青.人内皮抑素在毕赤酵母中的组成型表达及其活性检测[J].药物生物技术,2005,12(5):294-297,307.
作者姓名:梁丽敏  李校坤  苏志坚  黄亚东  吴晓萍  郑青
作者单位:暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室,暨南大学药学院生物制药教研室 广东广州510630,广东广州510630,暨南大学医药生物技术研究开发中心,广东广州510632,广东广州510630,暨南大学医药生物技术研究开发中心,广东广州510632,广东广州510630,暨南大学医药生物技术研究开发中心,广东广州510632,广东广州510630,暨南大学医药生物技术研究开发中心,广东广州510632,广东广州510630,暨南大学医药生物技术研究开发中心,广东广州510632
基金项目:国家973项目子课题(No.G1999054204)
摘    要:为获得大量具有生物学活性的重组人内皮抑素(Endostatin),在毕赤酵母中进行组成型表达的研究。将由毕赤酵母偏爱密码子组成的Endostatin cDNA插入组成型载体pGAPZαA中,构建表达载体pGAPZαA-ENDO,并转化到毕赤酵母X-33中。重组菌株在甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAP)启动子的调控作用下,进行组成型表达Endostatin蛋白。重组人Endostatin产量达到102mg/L。Western blot显示:表达蛋白能与兔抗Endostatin的多克隆抗体特异性结合。纯化后的重组Endostatin具有抑制人血管内皮细胞系ECV-304细胞增殖的活性。利用毕赤酵母组成型表达系统能获得大量具有生物活性的Endostatin蛋白。

关 键 词:重组人内皮抑素  毕赤酵母  组成型表达
文章编号:1005-8915(2005)05-0294-05
收稿时间:2004-12-07
修稿时间:2004-12-072005-03-10

Constitutive Expression of Human Endostatin in Pichia Pastoris and Bioactivity Assay
LIANG Li-min, LI Xiao-kun, SU Zhi-jian, HUANG Ya-dong, WU Xiao-ping, ZHENG Qing.Constitutive Expression of Human Endostatin in Pichia Pastoris and Bioactivity Assay[J].Pharmaceutical Biotechnology,2005,12(5):294-297,307.
Authors:LIANG Li-min  LI Xiao-kun  SU Zhi-jian  HUANG Ya-dong  WU Xiao-ping  ZHENG Qing
Institution:1. School of Pharmacy of J inan University, Guangzhou 510630 ; 2. Biopharmaceutical Research and Development Center of Jinan University, Guangzhou 510632,China
Abstract:
Keywords:Human Endostatin  P  pastoris  Constitutive expression  GAP promoter
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