融合型自杀基因Fcy::Fur/5-FC对人卵巢癌细胞杀伤作用的研究 |
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作者姓名: | 伍霞 钟玲 池余刚 蒋兴伟 王勇 |
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作者单位: | 重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010;重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010 |
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摘 要: | 目的研究融合型自杀基因Fcy∶∶Fur联合5-氟胞嘧啶(5-FC)对人卵巢癌细胞株(SKOV3)的杀伤作用。方法构建含有融合型自杀基因Fcy∶∶Fur的荧光真核表达质粒,转染SKOV3细胞,筛选稳定表达的细胞株,RT-PCR和Western blot检测Fcy∶∶Fur表达。以MTT法和FCM法检测5-FC对Fcy∶∶Fur转基因细胞的杀伤效应。结果测序鉴定证实插入片段正确。细胞转染24h后,60%转染细胞发出绿色荧光。经G418筛选,RT-PCR和Westernblot法检测到Fcy∶∶Fur表达。加入5-FC后,MTT法检测到明显杀伤效应,FCM法检测到显著凋亡峰。结论融合型自杀基因Fcy∶∶Fur联合5-FC对人卵巢癌细胞SKOV3有明显的杀伤作用。
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关 键 词: | 自杀基因 Fcy::Fur 基因转染 稳定表达 SKOV3 |
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