健脾消癌方干预结肠癌细胞外泌体MIF调控肝Kupffer细胞TGF-β1表达的研究

目的 通过细胞实验研究健脾消癌方干预结肠癌细胞外泌体(CT26-exo)中巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)对肝Kupffer细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法 采用CT26-exo干预肝Kupffer细胞，反转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝Kupffer细胞中TGF-β1 mRNA表达；进一步采用小干扰核糖核酸(siRNA)干扰技术敲低CT26细胞MIF基因表达后，用其外泌体干预Kupffer细胞，RT-PCR及酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Kupffer细胞TGF-β1表达；用不同浓度的健脾消癌方含药血清干预后，采用RT-PCR及蛋白免疫印迹法(WB)检测CT26细胞及其外泌体中MIF表达；用含药血清干预后的CT26-exo干预Kupffer细胞，RT-PCR及ELISA检测Kupffer细胞TGF-β1表达量。结果 CT26-exo干预后，小鼠Kupffer细胞TGF-β1 mRNA表达升高(P<0.05);敲低CT26细胞MIF基因表达后，其外泌体对Kupffer细胞中TGF-β1的上调作用减弱(P<0.05);20%的健脾消癌方含药...