| 布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5-90诱导巨噬细胞凋亡线粒体途径相关因子的表达比较 |
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| 引用本文： | 陈鹏博,任晓莉,张亚丽,陈创夫,王远志. 布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5-90诱导巨噬细胞凋亡线粒体途径相关因子的表达比较[J]. 中国病原生物学杂志, 2014, 0(3): 193-197 |
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| 作者姓名： | 陈鹏博 任晓莉 张亚丽 陈创夫 王远志 |
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| 作者单位： | [1]石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003 [2]莎车县农业局,新疆喀什844700 [3]石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室,新疆石河子832002 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目（No.2013BA105805）;国际科技合作项目（No.2013DFA32380）;国家自然科学基金项目（No.31260596）. |
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| 摘 要： | 目的比较布鲁氏菌强毒株16M和疫苗株M5-90侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7后其凋亡相关因子的转录和表达。方法建立16M、M5-90侵染RAW264.7模型,采用CFU计数法比较16M、M5-90侵染RAW264.7 4、8、12、24h后的胞内生存情况;采用qRT-PCR检测AIF、Bcl-2、Bax、Apaf-1、Bcl-xl基因转录水平的变化;采用ELISA检测TNF-α和Cyt C在细胞内的表达;采用激光共聚焦检测Cyt C在细胞内共定位表达情况。结果布鲁氏菌16M在侵染后4h~24h胞内CFU呈增多趋势,而M5-90CFU先增多后减少。qRT-PCR显示AIF基因的转录水平在侵染后4h~24h内呈上升趋势,且M5-90侵染组与16M侵染组比较差异无统计学意义(P0.05);由M5-90侵染诱导的Apaf-1基因转录水平与16M侵染组比较有统计学意义(P0.05);Bcl-xl的转录量随着侵染时间增长而不断增加,且16M诱导组与M5-90组比较差异无统计学意义(P0.05);M5-90侵染组Bax和Bcl-2水平与16M组比较差异均有统计学意义(P均0.05);M5-90侵染组Bax/Bcl-2比值与16M侵染组比较差异无统计学意义(P0.05)。ELISA分析显示TNF-α、Cyt C分泌量随着时间增长而增加,且M5-90诱导组与16M组比较差异无统计学意义(P均0.05)。激光共聚焦显示Cyt C定位在RAW264.7内,属于胞浆表达,且M5-90诱导的表达量与16M组比较差异无统计学意义(P0.05),并随感染时间的延长不断增加。结论布鲁氏菌疫苗株M5-90侵染RAW264.7 4h~24h内,凋亡相关因子Cyt C、AIF、Bax/Bcl-2、Apaf-1的表达量高于强毒株16M侵染组,而Bcl-xl则相反,表明在此侵染阶段M5-90具有更强的促细胞凋亡作用。
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| 关 键 词： | 布鲁氏菌 巨噬细胞 凋亡相关因子 ELISA qRT-PCR 激光共聚焦 |
Comparison of expression of factors related to mitochondrial pathways of apoptosis in macrophages induced with virulent Brucella strain 16M and vaccine strain M5-90 |
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| CHEN Peng-bo,REN Xiao-li,ZHANG Ya-li,CHEN Chuang-fu,WANG Yuan-zhi. Comparison of expression of factors related to mitochondrial pathways of apoptosis in macrophages induced with virulent Brucella strain 16M and vaccine strain M5-90[J]. Journal of Pathogen Biology, 2014, 0(3): 193-197 |
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| Authors: | CHEN Peng-bo REN Xiao-li ZHANG Ya-li CHEN Chuang-fu WANG Yuan-zhi |
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| Affiliation: | 1. College of Animal Science and Technology, Shihezi University, Shihezi , Xinj iang 832003, China; 2. Agricultural Office of Shanche County ; 3. Department of Microbiology and Immunology Shihezi University) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Brucella macrophage apoptosis related cytokines ELISA qRT-PCR confocal laser |
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