| Plk1330/597位丝氨酸磷酸化突变体对胞质分裂的影响 |
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| 引用本文： | 程里,陈立建,安然,都建.Plk1330/597位丝氨酸磷酸化突变体对胞质分裂的影响[J].细胞与分子免疫学杂志,2012,28(10):1016-1019. |
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| 作者姓名： | 程里 陈立建 安然 都建 |
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| 作者单位： | 1. 安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,安徽合肥,230032
2. 安徽医科大学第一附属医院麻醉科,安徽合肥,230032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30801329);教育部霍英东教育基金会高等院校青年教师基金(131033);安徽省优秀青年基金(10040606Y19) |
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| 摘 要： | 目的:研究Plk的330/597位丝氨酸的模拟磷酸化突变体Plk1S330/597D和不能磷酸化突变体Plk1S330/597A的绿色荧光融合蛋白在HeLa细胞中的定位以及对有丝分裂的影响。方法:将野生型Plk1-GFP质粒、模拟磷酸化型突变体Plk1S330/597D-GFP质粒和不能磷酸化突变体Plk1S330/597A-GFP质粒分别转染HeLa细胞株,免疫荧光法检测突变体融合蛋白Plk1S330/597D-GFP和Plk1S330/597A-GFP的细胞定位的定位,West-ern blot法检测上述突变体融合蛋白的表达。通过有丝分裂期的细胞计数,流式细胞仪检测细胞周期,观察转染突变体后HeLa细胞的有丝分裂进程。结果:模拟磷酸化突变体Plk1S330/597D和不能磷酸化突变体Plk1S330/597A的融合蛋白能正确表达。突变体在细胞有丝分裂过程中均能正确定位于动点和中体,但不能磷酸化突变体Plk1S330/597A融合蛋白对HeLa细胞的有丝分裂有明显的抑制作用,使胞质分裂期的细胞数量较对照组明显增多,产生G2/M期阻滞(P<0.01),并造成染色体分离滞后的现象。结论:Plk1激酶自身的磷酸化状态对其有丝分裂期功能具有重要作用,其330和597位丝氨酸去磷酸化能抑制细胞的有丝分裂,使细胞周期发生G2/M期阻滞。
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| 关 键 词： | Plk1激酶 磷酸化 突变体 有丝分裂 肿瘤发生 HeLa细胞 |
Effect of Plk1 330/597 serine phosphorylated mutant on cytokinesis during mitosis |
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| CHENG Li
,
CHEN Li-jian
,
AN Ran
,
DU Jian.Effect of Plk1 330/597 serine phosphorylated mutant on cytokinesis during mitosis[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2012,28(10):1016-1019. |
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| Authors: | CHENG Li CHEN Li-jian AN Ran DU Jian |
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| Institution: | 1* 1Department of Biochemistry and Molecular Biology,School of Basic Medicine,Anhui Medical University;2Department of Anesthesiology,First Affiliated Hospital of Anhui Medical University,Hefei 230032,China |
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