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| 稳定转染短发夹状RNA后子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因表达的变化 | |
| 引用本文： | Tao GS,Zhang KQ,Chen Y,Nie MF,Liu FY,Wu YL,Liu YZ,Wu XS. 稳定转染短发夹状RNA后子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因表达的变化[J]. 中华妇产科杂志, 2005, 40(10): 693-696 |
| 作者姓名： | Tao GS Zhang KQ Chen Y Nie MF Liu FY Wu YL Liu YZ Wu XS |
| 作者单位： | 1. 410011,长沙,中南大学湘雅二医院妇科 2. 湖南省计划生育研究所 3. 湖南师范大学生命科学院 |
| 基金项目： | 湖南省自然科学基金资助项目[03JJY-3056];国家科学技术部重大基础研究前期研究专项课题资助项目（2002cce00100） |
| 摘 要： | 目的探讨宫颈癌细胞株HeLa细胞稳定转染表达短发夹状RNA(shRNA)的质粒后,HeLa细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因(HPV18E6)表达的变化。方法实验组将本实验室前期构建的可遗传性表达HPV18E6shRNA的pE6-1shRNA质粒和含E6基因突变点的pE6-2shRNA质粒分别转染HeLa细胞,对照组以空质粒pSUPER和不加质粒的脂质体分别转染HeLa细胞。稳定转染后,氨基糖苷抗生素(G418)筛选阳性细胞克隆,RT-PCR技术和免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法分别检测HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达的变化。结果稳定转染后,G418筛选,实验组HeLa细胞有新的阳性细胞克隆形成,而对照组HeLa细胞最终全部死亡。实验组转染pE6-1shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA表达水平为0·76±0·28,明显低于对照组转染脂质体者(1·14±0·45)和转染pSUPER质粒者(1·12±0·23,P<0·05);HeLa细胞中HPV18E6蛋白阳性表达强度较对照组转染脂质体者弱。实验组转染pE6-2shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达水平分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0·05)。结论稳定转染表达HPV18E6shRNA的质粒后,宫颈癌细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达明显受到抑制。 |
| 关 键 词： | RNA干扰 宫颈肿瘤 转染 癌基因蛋白质类 病毒性 乳头状瘤病毒18型 短发夹状RNA 子宫颈癌细胞 稳定转染 E6基因 基因表达 |
| 收稿时间： | 2004-10-20 |
| 修稿时间： | 2004-10-20 |
Inhibitory effects of human papilloma virus 18 E6 gene in HeLa cell transfected with shRNA |
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| Tao Guang-shi,Zhang Ke-qiang,Chen Yong,Nie Mei-fang,Liu Feng-ying,Wu Yi-lin,Liu Yi-zhi,Wu Xiu-shan. Inhibitory effects of human papilloma virus 18 E6 gene in HeLa cell transfected with shRNA[J]. Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology, 2005, 40(10): 693-696 | |
| Authors: | Tao Guang-shi Zhang Ke-qiang Chen Yong Nie Mei-fang Liu Feng-ying Wu Yi-lin Liu Yi-zhi Wu Xiu-shan |
| Affiliation: | Department of Gynecology, Second Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410011, China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | RNA interference Cervix neoplasms Transfection Oncogene proteins, viral |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 PubMed 等数据库收录！ | |