不同脱细胞方法对无细胞真皮基质抗原成分的影响

目的：异体／异种真皮无细胞化可直接关系到移植后局部炎症反应-免疫反应程度和复合皮的质量．因而探索不同的脱细胞方法对无细胞真皮基质抗原成分的影响。方法：实验于1999—07／2000—07在第四军医大学动物实验外科完成．将人和小猪正常中厚皮肤经体积分数为0．002的戊二醛交联后，用1．25g／L胰蛋白酶、1.25g／L dispase和高渗盐(3mol／L NaCl)分别与体积分数为0．005的Trjton X-100依次或同时进行脱细胞处理24h．制成的脱细胞真皮基质(ADM)，再通过组织学和免疫组化方法进行抗原性比较。结果：单独使用胰蛋白酶、dispase和NaCl处理能使表皮有效地移除，但真皮中仍有较多细胞残留，如将其与Tnton X-100联合或再经Triton X-100处理24h后，真皮组织内细胞相关抗原(HLA-ABC，HLA-DR，波形蛋白，结蛋白，肌动蛋白．Ⅷ因子相关抗原和细胞角蛋白)全部消失，并且细胞外基质成分（透明质酸、纤连蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原)以及Ⅰ，Ⅲ和Ⅶ型胶原等抗原明显减弱。相比之下，戊二醛交联组和Nacl+Triton X-100处理的ADM浅层保留较多的Ⅳ型胶原、纤连蛋白和层粘连蛋白成分。各种方法制备ADM的抗原强弱依次为：NaCl(+Triton X-100)&;gt;dispase(+Triton X-100)&;gt;胰蛋白酶(+Triton X-100)。结论：采用胰蛋白酶联合去污剂制备ADM是一简单．经济和有效的脱细胞方法，能有效地降低组织的抗原性。