| 大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 王锋超,高京生,粟永萍,徐辉,王军平,艾国平,苑晓燕,楼淑芬,刘晓宏,章波,黄跃生,蒋建新. 大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建[J]. 第三军医大学学报, 2004, 26(1): 10-14 |
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| 作者姓名： | 王锋超 高京生 粟永萍 徐辉 王军平 艾国平 苑晓燕 楼淑芬 刘晓宏 章波 黄跃生 蒋建新 |
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| 作者单位： | 第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400038 |
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| 摘 要： | ![]()
目的克隆和鉴定大剂量辐射前后大鼠空肠上皮细胞IEC-6差异表达基因,为探索肠上皮细胞辐射损伤修复的分子机制提供线索.方法IEC-6细胞经35Gyγ射线照射后由抑制性消减杂交(SSH)方法和T/A克隆技术进行差异表达基因消减cDNA文库的构建,用反向Northerm杂交法对库中的EST序列进行筛选,挑取阳性克隆测序,和GenBank比对后挑选有限克隆进行正向Northerm杂交进行验证.结果扩增消减杂交cDNA文库得到约2 000个克隆,随机选取96个白色克隆进行PCR扩增,用反向Northern杂交法对库中的EST片段进行筛选得到15个阳性克隆,代表12个基因的转录产物,部分基因功能已经明确,涉及细胞骨架、细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面,另外还获得一新的cDNA序列.结论SSH法建立了IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库,一次获得多条差异显示EsT片段,基因种类涉及细胞骨架,细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面,这些基因可能在肠上皮细胞的辐射损伤反应中起重要作用.
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| 关 键 词： | IEC-6 大剂量辐射 抑制性消减杂交 基因文库 |
| 文章编号： | 1000-5404(2004)01-0010-05 |
| 修稿时间： | 2003-02-17 |
Construction of subtractive cDNA library for differentially expressed genes in rat intestinal epithelial cells exposed to high-dose radiation by suppression subtractive hybridization |
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| WANG Feng chao,GAO Jing sheng,SU Yong ping,XU Hui,WANG Jun ping,AI Guo ping,YUAN Xiao yan,LOU Shu fen,LIU Xiao hong,ZHANG Bo,HUANG Yue sheng,JIANG Jian xin. Construction of subtractive cDNA library for differentially expressed genes in rat intestinal epithelial cells exposed to high-dose radiation by suppression subtractive hybridization[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2004, 26(1): 10-14 |
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| Authors: | WANG Feng chao GAO Jing sheng SU Yong ping XU Hui WANG Jun ping AI Guo ping YUAN Xiao yan LOU Shu fen LIU Xiao hong ZHANG Bo HUANG Yue sheng JIANG Jian xin |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | IEC-6 |
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