| 杆状病毒表面展示丙型肝炎病毒结构蛋白及其对丙型肝炎病毒的检测 |
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| 作者姓名： | 李祥 金爱慧 邹立林 高基民 吕建新 |
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| 作者单位： | 温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室, 浙江省模式生物技术与应用重点实验室,浙江,温州,325035 |
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| 基金项目： | 国家青年自然科学基金资助项目(No.30900344);浙江省自然科学基金资助项目(No.Y2080676);温州市科技计划项目(No.Y20080011) |
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| 摘 要： | 目的:利用杆状病毒表面展示系统对丙型肝炎病毒(HCV)进行早期检测。方法:利用杆状病毒表面展示(baculovirussurfacedisplay)技术,构建展示HCV结构蛋白的重组杆状病毒vAc-Flag-HCVC-GP64、vAc-Flag-HCVE-GP64和vAc-Flag-CE-GP64。结果:(1)Westernblotting分析结果表明重组杆状病毒表达了C(HCV核心蛋白)、E(HCV包膜蛋白)和CE蛋白。(2)激光共聚焦显微镜检测结果表明,重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf9后在昆虫细胞膜上表达了C、E和CE蛋白。(3)免疫金电子显微镜观察表明重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上。(4)重组病毒进行浓缩纯化后,利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术对HCV样本进行检测,vAc-Flag-CE-GP64的检测阳性率可达80.2%。结论:vAc-Flag-CE-GP64可用于对HCV进行早期检测。
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 丙型 杆状病毒表面展示 时间分辨荧光免疫分析 |
| 收稿时间： | 2012-03-09 |
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