高糖微环境下miR-449对人骨髓间充质干细胞成骨分化的作用和机制研究

目的 探讨miR-449在高糖(HG)作用下对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成骨分化的影响及其可能的作用机制。方法 将hBMSCs接种于成骨培养基培养，诱导其成骨分化。实验组：成骨培养基中加入高糖25 mmol/L,模拟高糖微环境处理。对照组：细胞维持在5 mmol/L葡萄糖的正常培养基中。采用茜素红染色、碱性磷酸酶活性测定、双荧光素酶测定、实时定量PCR(qRT-PCR)检测等方法测定以下指标：(1)miR-449在HG诱导的hBMSCs成骨分化时的表达水平；(2)miR-449模拟物和抑制物对碱性磷酸酶(ALP)活性，成骨相关标志物表达的影响；(3)Sirt1和Fra-1的过表达对miR-449在HG处理的hBMSCs成骨分化标志物表达的影响。结果 (1)HG处理的实验组hBMSCs成骨分化低于对照组细胞(P<0.05),miR-449表达水平较对照组降低(P<0.05)。(2)在HG诱导的hBMSCs成骨分化过程中，miR-449模拟物可降低ALP活性(P<0.05),降低成骨标志物的mRNA表达(P<0.05);而miR-449抑制剂能提高成骨标志物...