| 小鼠烟酰胺N-甲基转移酶基因的克隆及其表达 |
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| 引用本文： | 常新荣,陈玉英,常平安. 小鼠烟酰胺N-甲基转移酶基因的克隆及其表达[J]. 南华大学学报(医学版), 2012, 40(5): 457-460 |
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| 作者姓名： | 常新荣 陈玉英 常平安 |
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| 作者单位： | 1. 广西柳钢医院神经内科,广西,柳州,545002
2. 重庆邮电大学生物信息学院 |
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| 基金项目： | 重庆市自然科学基金，重庆市高校优秀人才计划支持项目 |
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| 摘 要： | 目的 克隆和表达小鼠烟酰胺N-甲基转移酶(NNMT)基因.方法 设计特异引物,利用逆转录PCR克隆小鼠NNMT编码cDNA序列,并进行序列测定;然后通过PCR扩增,双酶切回收cDNA片段定向重组到载体pEGFP-N3中,采用PCR和酶切鉴定重组表达质粒;最后将其转染到真核细胞中,通过Western杂交检测其表达,用激光共聚焦显微镜检测其细胞分布.结果经RT-PCR获得了小鼠NNMT的编码cDNA序列,经测序证实克隆序列完全正确;PCR和酶切鉴定表明绿色荧光蛋白(GFP)标记的NNMT表达质粒pNNMT-GFP成功构建;转染至HEK293T细胞中,Western杂交检测到绿色荧光蛋白融合的NNMT特异表达,显微观察表明NNMT分布在细胞质中.结论成功构建了NNMT的表达质粒,并在小鼠中实现其表达.
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| 关 键 词： | 烟酰胺N-甲基转移酶 表达质粒 编码cDNA 细胞定位 |
| 收稿时间： | 2012-04-16 |
Cloning and Expression of Mouse Nicotinamide N-methyltransferase |
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| CHANG Xinrong,CHEN Yuying,CHANG Pingan. Cloning and Expression of Mouse Nicotinamide N-methyltransferase[J]. Journal of Nanhua University(Medical Edition), 2012, 40(5): 457-460 |
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| Authors: | CHANG Xinrong CHEN Yuying CHANG Pingan |
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| Affiliation: | Department of Neurology, Guangxi Liuzhou Steel Hospital, Liuzhou, Guangxi 400052,China |
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