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单管多重RT-PCR检测肠道病毒核酸及其临床应用
引用本文:龙辉,谢建红. 单管多重RT-PCR检测肠道病毒核酸及其临床应用[J]. 国际检验医学杂志, 2016, 0(11). DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.019
作者姓名:龙辉  谢建红
作者单位:1. 广东省清远市妇幼保健院 511500;2. 广东省珠海市妇幼保健院 519000
摘    要:
目的建立一种快速检测肠道病毒通用型(EV)、科萨奇病毒A16(CA16)和肠道病毒71(EV71)核酸的单管多重反转录聚合酶链反应(RT-PCR),并探讨其临床应用价值。方法建立单管多重RT-PCR检测EV、CA16和EV71的反应体系,并优化退火温度、各引物比例和循环参数等反应条件;采用自建RT-PCR体系检测136例手足口病患儿大便标本的肠道病毒核酸。结果单管多重RT-PCR检测体系的最佳反应条件:退火温度为54℃;EV、CA16和EV71引物比例为2∶1∶1;循环参数为35。采用自建单管多重RT-PCR从136例标本中检出EV阳性46例(33.82%),CA16阳性14例(10.29%),EV71阳性14例(10.29%),其中CA16、EV71同时阳性2例。结论成功建立检测EV、CA16和EV71核酸的单管多重RT-PCR,并应用于手足口病患儿的病原学检测。

关 键 词:反转录聚合酶链反应  手足口病  肠道病毒  核酸

Development and application of single-tube multiplex RT-PCR for detecting enterovirus RNA
Abstract:
Keywords:
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