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柯萨奇病毒B组3型VP1蛋白的原核表达及免疫效果研究
引用本文:李伟,蓝佳明,李剑,金玉怀,高志云,揣侠,刘贵霞,张永红,王永祥.柯萨奇病毒B组3型VP1蛋白的原核表达及免疫效果研究[J].中国免疫学杂志,2009,25(4).
作者姓名:李伟  蓝佳明  李剑  金玉怀  高志云  揣侠  刘贵霞  张永红  王永祥
作者单位:河北医科大学病原生物学教研室,石家庄,050017
基金项目:河北省科学技术研究与发展计划项目 
摘    要:目的:用原核细胞表达柯萨奇病毒B组3型VP1蛋白并观察其免疫效果.方法:构建原核表达质粒pET-his/VP1,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,诱导VP1蛋白的表达并纯化.BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组.实验组腹腔注射VP1蛋白,对照组注射PBS,每3周免疫1次,共免疫3次.每次免疫后2周取血清,用微量中和试验法检测血清CVB3特异性中和抗体滴度;末次免疫后3周,每组随机取3只小鼠,用细胞计数试剂盒检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;每组另随机抽取3只腹腔注射3LD50CVB3,第7天检测血中病毒滴度;用致死量的CVB3攻击每组剩余12只小鼠,观察免疫保护作用.结果:实验组小鼠血清中和抗体滴度随免疫次数增加而提高(P<0.05),第3次免疫后中和抗体滴度达70.79±1.31,明显高于PBS对照组(P<0.05);非特异性淋巴细胞增殖活性亦明显高于PBS组(P<0.05),但特异性淋巴细胞增殖活性和CTL杀伤活性两组间无统计学差别(P>0.05);CVB3攻击后,实验组小鼠血中病毒滴度显著降低,生存率达33.33%,而PBS组小鼠无存活,差异有统计学意义(P<0.05).结论:VP1蛋白可显著增强小鼠的体液免疫应答水平,提高致死量CVB3感染后小鼠的生存率.

关 键 词:柯萨奇病毒B组  亚单位疫苗  免疫应答  原核表达

Expression of CVB3 VP1 protein in prokaryotic system and study on its immune effects
LI Wei,LAN Jia-Ming,LI Jian,JIN Yu-Huai,GAO Zhi-Yun,CHUAI Xia,LIU Gui-Xia,ZHANG Yong-Hong,WANG Yong-Xiang.Expression of CVB3 VP1 protein in prokaryotic system and study on its immune effects[J].Chinese Journal of Immunology,2009,25(4).
Authors:LI Wei  LAN Jia-Ming  LI Jian  JIN Yu-Huai  GAO Zhi-Yun  CHUAI Xia  LIU Gui-Xia  ZHANG Yong-Hong  WANG Yong-Xiang
Abstract:
Keywords:
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