基于PCR的CYP2C9基因多态性测定方法概述

细胞色素P4502C9(CYP2C9)是CYP2C亚家族的主要成员之一,约占人类肝细胞微粒体P450酶系的20%。CYP2C9参与人体内多种药物的代谢过程,如华法林、甲苯磺丁脲、格列吡嗪、塞来考昔、氟伐地汀等1]。大量研究表明,CYP2C9在人体内药物代谢中呈现出遗传多态性,不同的等位基因编码不同的酶,对底物表现出不同的亲和力和不同的催化活性,并在前致癌物、前毒物和致突变剂的活化中也起一定作用2]。CYP2C9作为一种重要的CYP450酶成为当前研究的热点,其中研究最多的是CYP2C9*1、CYP2C9*2、CYP2C9*3,其他还有CYP2C9*4~CYP2C9*13等,对CYP2C9多态性的测定是研究的重要内容,特别是基于PCR的CYP2C9多态性测定方法的研究。由于此类测定方法的准确性和及时性等有差异,本文从原理、优缺点等方面综述了基于PCR的多种CYP2C9多态性测定方法。1逆转录PCR逆转录PCR是被广泛应用的基因测定方法,它的基本原理是:首先提取RNA;根据待测基因序列设计合成引物,然后加入引物在逆转录酶的作用下合成cDNA;加热变性成为单链cDNA后,加入与之互补的另一引物,进行PCR扩增。...