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基于NF-κB通路探讨六神胶囊对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响
作者姓名:马钦海  陈瑞晗  雷标  王周琅  谢玉琪  刘斌  杨子峰
作者单位:广州医科大学附属第一医院;昆明理工大学医学院
基金项目:国家自然科学基金(82004033);广东省基础与应用基础研究基金(2020A1515111155);澳门特别行政区科学技术发展基金(0172/2019/A3);中国博士后科学基金(2020T130028ZX);广东省普通高校新冠肺炎疫情防控专项(2020KZDZX1159)。
摘    要:目的探讨六神胶囊的抗炎作用及机制。方法 RAW264.7细胞分为六神胶囊组和地塞米松组,六神胶囊按9.76、4.88、2.44、1.22、0.61、0.31、0.15μg/ml梯度稀释;地塞米松按250、125、62.5、31.25、15.63、7.81、3.91μg/ml梯度稀释,选择细胞存活率大于90%的最大3个六神胶囊浓度和最大无毒剂量的地塞米松进行后续实验。RAW264.7细胞分为空白组,地塞米松组,模型组及六神胶囊高、中、低剂量组。除空白组外,其余各组采用脂多糖诱导建立炎症模型。造模后六神胶囊高、中、低剂量组分别加入筛选浓度的高、中、低浓度六神胶囊溶液各1 ml;地塞米松组加入筛选浓度的地塞米松溶液1 ml;模型组和空白组加入1 ml培养液。24 h后收集细胞上清液检测一氧化氮(NO)的浓度,ELISA法检测细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的含量,实时荧光定量PCR法检测细胞中IL-1β、TNF-α、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达,蛋白印迹实验检测核因子κB p65 (NF-κB p65)、磷酸...

关 键 词:炎症反应  六神胶囊  巨噬细胞  脂多糖  炎症因子  核因子-κB  一氧化氮
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