| 溶藻弧菌抗独特型抗体单链抗体基因真核表达载体的构建 |
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| 作者姓名： | 付建芳 黄威权 秦红 金晓航 杨安钢 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院内分泌科,陕西,西安,710032
2. 第四军医大学基础部组织胚胎学教研室,陕西,西安,710032
3. 第四军医大学基础部免疫学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的：构建溶藻弧菌抗独特型抗体的单链抗体（scFv）基因的毕赤酵母分泌型表达载体.方法：从分泌溶藻弧菌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株（2F4）中克隆该抗体的重链可变区（VH）基因和轻链可变区（VL）基因（GenBank accession No：DQ011530和 DQ011531）, 并通过基因重组为scFv基因.然后将其克隆入毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K中, 经序列测定后, 电转化入毕赤酵母菌SMD1168中, 将经表型筛选和G418抗性筛选的重组酵母菌株进行PCR鉴定.结果：获得毕赤酵母菌分泌型表达载体pPIC9K-scFv, 经G418浓度梯度筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母菌株.结论：成功地构建溶藻弧菌抗独特型抗体的scFv基因的真核表达载体, 为进一步研究其生物学活性奠定了基础.
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| 关 键 词： | 溶藻弧菌 单链抗体 真核表达 毕赤酵母菌 |
| 文章编号： | 1007-8738（2007）08-0767-03 |
| 修稿时间： | 2006-09-202006-12-18 |
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