| 检测NDV诱导特异性细胞免疫的ELISPOT试验方法建立 |
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| 引用本文： | 李梅,李宝全,宋文刚,郭慧君,王海荣,柴家前,常维山.检测NDV诱导特异性细胞免疫的ELISPOT试验方法建立[J].中国免疫学杂志,2008,24(10). |
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| 作者姓名： | 李梅 李宝全 宋文刚 郭慧君 王海荣 柴家前 常维山 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
2. 泰山医学院免疫学教研室,泰安,27100 |
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| 摘 要： | 目的：建立检测新城疫病毒（NDV）诱导特异性细胞免疫的ELISPOT试验方法,实时分析NDV免疫鼠的IFN-γ水平。方法：用NDV单克隆抗体包被96孔混纤板,在反应孔中加入小鼠脾淋巴细胞和NDV刺激抗原,37℃,5%CO2培养7小时。裂解细胞,依次加入酶标二抗、底物、显色液,倒置显微镜下计数ELISPOT斑点。结果：ELISPOT试验的特异性与培养时间和刺激抗原浓度密切相关。在106/孔的脾淋巴细胞浓度下,培养时间越长、刺激抗原越多,试验的特异性越低;当培养时间为7小时,抗原量为5μg/孔时,试验的特异性最强。ELISPOT斑点数,随细胞浓度的增加而增加,当小鼠的脾淋巴细胞浓度为106/孔时,最有利于斑点的计数,试验误差最小。结论：试验成功建立了检测NDV细胞免疫的ELISPOT方法,可用于NDV细胞免疫的研究。
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| 关 键 词： | 新城疫病毒（Newcastle disease virus） ELISPOT IFN-γ检测 |
The development of an ELISPOT assay for detecting NDV-induced cellular immune responses |
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| LI Mei,LI Bao-Quan,SONG Wen-Gang,GUO Hui-Jun,WANG Hai-Rong,CHAI Jia-Qian,CHANG Wei-Shan.The development of an ELISPOT assay for detecting NDV-induced cellular immune responses[J].Chinese Journal of Immunology,2008,24(10). |
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| Authors: | LI Mei LI Bao-Quan SONG Wen-Gang GUO Hui-Jun WANG Hai-Rong CHAI Jia-Qian CHANG Wei-Shan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ELISPOT |
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