| 微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库的构建 |
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| 引用本文： | 姚龙泉,尹继刚,张西臣,李建华. 微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库的构建[J]. 中国人兽共患病杂志, 2006, 22(1): 26-28,42 |
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| 作者姓名： | 姚龙泉 尹继刚 张西臣 李建华 |
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| 作者单位： | 吉林大学畜牧兽医学院，吉林大学畜牧兽医学院，吉林大学畜牧兽医学院，吉林大学畜牧兽医学院 长春130062 沈阳农业大学畜牧兽医学院，长春130062，长春130062，长春130062 |
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| 摘 要： | 目的为筛选微小隐孢子虫保护性抗原基因,构建了微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库。方法用Trizol试剂提取微小隐孢子虫总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,用EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,使形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。经Mini Column纯化,收集400bp以上的双链cDNA片段,将其连接于带有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select 10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示文库。结果经测定,库容量为1.2×107pfu/mL,重组率为96.7%,扩增后文库滴度为2.4×1010pfu/mL。对随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,92%的插入片段大于400bp。结论成功构建了微小隐孢子虫T7噬菌体展示文库。
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| 关 键 词： | 微小隐孢子虫 T7噬菌体展示文库 |
| 文章编号： | 1002-2694（2006）01-26-03 |
| 收稿时间： | 2005-07-16 |
| 修稿时间： | 2005-07-162005-09-17 |
Construction of T7 phage display library from Cryptosporidium parvum |
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| YAO Long-quan,YIN Ji-gang,ZHANG Xi-chen,LI Jian-hua. Construction of T7 phage display library from Cryptosporidium parvum[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2006, 22(1): 26-28,42 |
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| Authors: | YAO Long-quan YIN Ji-gang ZHANG Xi-chen LI Jian-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cryptosporidium parvum T7 phage display library |
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