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人CD40分子基因转染人脐静脉内皮细胞ECV-304
引用本文:王维蓉,林蓉,杨玉琮,甘伟杰,刘俊田,吕社民.人CD40分子基因转染人脐静脉内皮细胞ECV-304[J].第一军医大学学报,2005,25(12):1474-1477.
作者姓名:王维蓉  林蓉  杨玉琮  甘伟杰  刘俊田  吕社民
作者单位:[1]西安交通大学医学院药理教研室,陕西西安710061 [2]西安交通大学医学院第一医院实验医学中心,陕西西安710061 [3]西安交通大学医学院生物化学教研空,陕西西安710061
基金项目:国家自然科学基金(30371759).
摘    要:目的 构建人CD40的真核表达载体,建立持续、稳定高表达CD40的人脐静脉内皮细胞ECV-304。方法 将含有CD40的克隆载体pUCD40酶切后,再克隆到真核表达载体pCDNA3.1中,构建重组质粒pCDNA3.1(+)/CD40,并对重组质粒进行酶切鉴定。然后用脂质体法将重组质粒转染ECV-304,G418筛选转染的细胞。RT-PCR、Western-blotting和流式细胞仪定性定量检测转染后的ECV-304的CD40的表达情况。结果 经酶切鉴定,重组体中已插入目的基因片段CD40。RT-PCR和Western-blotting证实,重组质粒转染的ECV-304中有CD40基因的表达,流式细胞仪检测转染后的ECV-304的CD40的表达率为95%。结论 成功构建了真核表达载体pCDNA3.1(+)/CD40.并建立了高表达CD40的ECV-304,为筛选抗动脉粥样硬化药物奠定了基础.

关 键 词:CD40  人脐静脉内皮细胞  转染  基因表达
文章编号:1000-2588(2005)12-1474-04
收稿时间:2005-05-16

Liposome-mediated human CD40 gene transfection and human umbilical vein endothelial ECV-304 cells
WANG Wei-rong, LIN Rong, YANG Yu-cong, GAN Wei-jie, LU Jun-tian, LU She-min.Liposome-mediated human CD40 gene transfection and human umbilical vein endothelial ECV-304 cells[J].Journal of First Military Medical University,2005,25(12):1474-1477.
Authors:WANG Wei-rong  LIN Rong  YANG Yu-cong  GAN Wei-jie  LU Jun-tian  LU She-min
Institution:Department of Pharmacology, Medical School of Xi'an Jiaotong University, Xi'an 710061, China. wangweirong1222@163.com
Abstract:
Keywords:CD40  human endothelial cells  transfection  gene expression
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