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| 人输卵管蛋白全长cDNA克隆及真核细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 罗金平,潘勇,颜桂军,顾正,左嘉客. 人输卵管蛋白全长cDNA克隆及真核细胞中的表达[J]. 生殖与避孕, 2003, 23(5): 259-265 |
| 作者姓名： | 罗金平 潘勇 颜桂军 顾正 左嘉客 |
| 作者单位： | 1. 复旦大学上海医学院,上海,200032;计划生育药具国家重点实验室,上海市计划生育科学研究所,上海,200032 2. 计划生育药具国家重点实验室,上海市计划生育科学研究所,上海,200032 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展基金(G1999055902) |
| 摘 要： | 目的:克隆人输卵管蛋白(hOviductin)全长cDNA序列,真核细胞中表达,并了解hOviductin是否与大鼠卵母细胞结合。方法:构建人输卵管黏膜上皮细胞cDNA文库,以~(32)P标记的兔输卵管蛋白全长cDNA序列为探针,自文库中筛选hOviductin全长cDNA序列。将获得的hOviductin编码区cDNA序列插入pEGFP-N1真核表达载体,转染HeLa细胞,表达分泌重组的绿色荧光蛋白(EGFP)-hOviductin,并估量其浓度。激光扫描共聚焦显微镜下观察EGFP-hOviductin与大鼠卵巢的卵丘细胞-卵母细胞复合物(COC)或去除透明带后的裸卵的结合情况。结果:所构建的cDNA文库重组率为98.5％,滴度为1.1×10~6pfu/mL。克隆所得hOviductin全长cDNA约为2500 bp,Gen-Bank的登录号为AY189737。EGFP-hOviductin在条件培液中的浓度为0.236 nmol/L,能结合在去透明带的大鼠裸卵质膜外表面,而未见其与COC结合。结论:hOviductin能在HeLa细胞中表达分泌,其分泌产物可结合于大鼠裸卵质膜外表面。 |
| 关 键 词： | 人输卵管黏膜上皮细胞cDNA文库 人输卵管蛋白 克隆 表达 |
| 文章编号： | 0253-357X(2003)05-0259-07 |
| 修稿时间： | 2003-05-19 |
Cloning of Human Oviductin cDNA and Its Expression in HeLa Cells |
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| Jin-ping LUO. Cloning of Human Oviductin cDNA and Its Expression in HeLa Cells[J]. Reproduction and Contraception, 2003, 23(5): 259-265 | |
| Authors: | Jin-ping LUO |
| Affiliation: | Jin-ping LUO~ |
| Abstract: | |
| Keywords: | human oviduct mucosa epithelial cells eDNA library human oviductin cloning expression |
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